章节内容
附录 1无菌试验培养基处方
| 1硫乙醇酸盐培养基 | |
| 胰酪蛋白胨（或酪素胰酶消化液，以总氮计2000mg） | 15g |
| 酵母浸出粉（或酵母透析液200ml） | 5g |
| 葡萄糖 | 5g |
| 氯化钠 | 2.5g |
| L-胱氨酸（或半胱氨酸盐酸盐） | 0.5g |
| 硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸0.6ml） | 0.5g |
| 琼脂 | 0.65～0.75g |
| 新鲜配制的0.1%刃天青溶液（或0.2%美蓝溶液0.5ml） | 1.0ml |
| 去离子水（或蒸馏水） | 加至1000ml |
| 最后pH7.1±0.2 | |
| 2 硫乙醇酸盐培养基（不含琼脂） | |
| 胰酪蛋白胨（或酪素胰酶消化液，以总氮计2000mg） | 15g |
| 酵母浸出粉（或酵母透析液200ml） | 5g |
| 葡萄糖 | 5g |
| 氯化钠 | 2.5g |
| L-胱氨酸（或半胱氨酸盐酸盐） | 0.5g |
| 硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸0.6ml） | 0.5g |
| 去离子水（或蒸馏水） | 加至1000ml |
| 最后pH7.1±0.2 | |
| 3 改良马丁培养基 | |
| 葡萄糖 | 20g |
| 蛋白胨 | 5g |
| 酵母浸出粉（或酵母透析液100ml） | 2g |
| 磷酸氢二钾 | 1g |
| 硫酸镁（含7分子结晶水） | 0.5g |
| 去离子水（或蒸馏水） | 加至1000ml |
| 最后pH6.4±0.2 | |
| 4 猪胃消化液 | |
| 半固体培养基 | |
| 猪胃消化液 | 500ml |
| 1:2牛肉浸液 | 500ml |
| 氯化钠 | 2.5g |
| 葡萄糖 | 1g |
| 琼脂 | 3～4g |
| 牛心消化液 | 1000ml |
| 酵母浸膏 | 1g |
| 琼脂 | 3～4g |
附录2 需-厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法
1 菌种
1.1 需氧菌
乙型溶血性链球菌（32210株），短芽胞杆菌（7316株）。
1.2厌氧菌
生孢子梭状芽胞杆菌（64941株）。
以上菌株均由中国药品生物制品检定所分发。
2 培养基
凡应用于无菌试验的培养基（增菌和试验用）都应进行灵敏度试验。
3 操作
3.1 不应在同一无菌操作室内同时操作2个菌株。
3.2 将菌种接种于适宜的培养基，经30～35℃培育一定时间（乙型溶血性链球菌和生孢子梭状芽胞杆菌培育24～48小时，短芽胞杆菌培育18～20小时）后，将乙型溶血性链球菌和短芽胞杆菌分别刮入灭菌的生理盐水内制成均匀菌液，生子孢梭状芽胞杆菌先将菌液吸入灭菌的试管内，再用灭菌生理盐水稀释适宜浓度制成均匀菌液，再将菌液稀释至与标准比浊管相同之浓度。然后用0.1%蛋白胨水作10倍系列稀释。
3.3 将10-6～10-8（短芽胞杆菌、生子孢梭状芽胞杆菌为10-6～10-8，乙型溶血性链球菌为10-7～10-9）菌液各1ml分别接种到9ml（用于厌氧菌的培养基在试管中装置高度不得低于7cm）试验用培养基中，每个稀释度至少接种3管，并用未接种的培养基做对照，将接种乙型溶血性链球菌、生子孢梭状芽胞杆菌的培养基，置30～35℃培育3天，接种短芽胞杆菌的培养基培育5天，记录结果。
4 结果判定
以接种后培养基管数的2/3以上呈现生长的最高稀释度为该培养基的灵敏度，3次试验中，以2次达到的最高灵敏度为判定标准。
附录3 霉菌无菌试验培养基灵敏度试验法
1 菌种
白色念珠菌、腊叶芽枝霉，由中国药品生物制品检定所分发。
2 培养基
凡应用于霉菌无菌试验用的培养基都应进行灵敏度试验。
3 操作
3.1 操作霉菌的无菌室应与其他无菌室隔离，有2个以上菌株试验时，不应在同一无菌操作室内同时进行。
3.2 将菌接种在土豆培养基上，20～25℃培养5～7天后用灭菌生理盐水洗下菌苔，移入装有玻璃珠的大管中将孢子打散，经装有脱脂棉注射器过滤。将菌液稀释至与标准比浊管相同之浓度，然后做10倍系列稀释。
3.3 将10-5～10-7菌液各1ml分别接种到9ml试验培养基中，每个稀释度至少接种3管并用未接种过的培养基作对照，20～25℃培育5天，逐日观察结果。
4 结果判定
以接种培养基管数的2/3以上呈现生长的最高稀释度为该培养基的灵敏度，3次试验中以2次达到的最高灵敏度为判定标准。