2．幽门螺杆菌的基础实验研究

研究表明，幽门螺杆菌（Helicobacterpylori,Hp）与胃炎、消化性溃疡等胃部疾患密切相关，为此，我们对某些实验性动物进行实验，结果发现Wistar大鼠经口感染Hp，可导致实验性感染。从其胃组织中检查到并分离出Hp，粘膜组织亦显示某些病理变化。从而为研究Hp实验性感染提供较为合适的一种动物模型。
1 材料和方法
1.1 菌株 幽门螺杆菌Hp379及Hp404株，系北京市积水潭医院消化内科就诊的胃病患者，经由内窥镜取得的胃粘膜进行细菌培养分离到的。经过鉴定，由本室传代保存。
1.2 动物 Wistar大鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所。新西兰种家兔，C57和BALB/小鼠，由本所动物室供给。
1.3 感染方法 Wistar大鼠的实验分2次进行。第1次用出生5个月（体重175g～254g）的成年鼠，第2次用出生两个月（体重152g～174g）的幼龄鼠。动物先禁食12h～14h，用胃管喂以5%Na2HCO32ml,15min后用胃管注入Hp379或Hp404株的菌液1.5ml(1010CFU/ml,30min后给食。每周感染1次，共4次。对照组动物不感染Hp，饲养条件与实验组相同。用以感染的家兔为幼龄兔（体重1200g～1500g）。C57小鼠为4周龄幼鼠（10g～12g），BABL/C用成年鼠（18g～20g）。感染方法同大鼠，家兔每次感染量为2ml，小鼠为0.5ml(1010CFU/ ml)，每周感染1次，共5次。动物在最后1次感染后的第7d～10d，禁食12h～14h后，乙醚麻醉处死，无菌操作取出胃，用灭菌PBS洗去胃内容物，从靠近幽门端的不同部位剪取胃粘膜3～4小块，加含10%小牛血清的布氏肉汤2ml，用组织研磨器制成浆，用以做尿素酶试验，直接涂片检菌和细菌培养。其余的胃组织用10%甲醛（PBS配制）固定，供病理学检查。
1.4　 细菌学检查　①尿素酶试验基本参考Morris等的方法。②胃粘膜直接涂片检菌法：取粘膜匀浆滴推成涂片，用甲醇固定10min，0.3%碱性复红染色，镜检Hp菌。③Hp菌培养：以布氏琼脂为基础，加入6%脱纤维羊血及脱氧胸苷酸（TMP）5mg/L，万古霉素6mg/L，两性霉素2mg/L，制成血平板后，置4°C保存备用。取胃粘膜匀浆0.2ml于血平板后，涂匀后放入含10%CO2、5%O2及85%N2的混合气体培养箱中，57°C培养72h后观察结果。
1.5 病理学检查 　甲醛固定的胃组织,石蜡包埋，切成6μm厚的组织切片。分别用苏木素-伊红和Warthin-Starry镀银染色，观察病理改变和检查组织切片中的Hp。
2 结果
2.1　尿素酶试验　经口感染Hp的8只大鼠，其胃粘膜做尿素酶试验，多数在4h内，个别的24h出现阳性反应。对照组大鼠的胃粘膜呈阴性反应。经哭喊Hp的家兔、C57和BALA/C小鼠的胃粘膜，均呈阴性反应。
2.2 　涂片细菌检查　 感染Hp的8只大鼠的胃粘膜匀浆，制成涂片染色后镜检，均检查到Hp。未感染的大鼠胃粘膜涂片未找到Hp。感染Hp的兔、C57和BALB/C小鼠的胃粘膜涂片亦未检查到Hp。
2.3 细菌培养 各组动物的胃粘膜组织都做了Hp培养，结果只有感染Hp的大鼠胃组织，分离出Hp。其他各组均款培养出Hp。
2.4 组织切片细菌检查 胃粘膜组织切片用Warthin-Starry染色，背景为淡黄色，Hp染色成黑色。感染Hp的大鼠，无论是幼龄鼠或是成年鼠，其胃粘膜切片中均可找到Hp，它们主要分布于粘液层。粘膜上皮细胞的表面和粘膜的隐窝处。切片中的Hp形成呈半圆、S或螺旋状，未感染Hp的正常大鼠，胃组织中未找到Hp。感染Hp 的家兔、C57和BALB/C小鼠的胃切片中，亦未检到Hp。
2.5 病理组织学检查 感染Hp大鼠的胃组织切片中，可见粘膜上皮细胞变性病灶，细胞肿胀而变得不规则，胞浆内结构不清或消失。粘膜层见有单个核细胞浸润病灶。
3 讨论
上述结果表明Wistar大鼠对Hp易感。经口感染Hp，可从其胃粘膜中检查到并分离出Hp，胃粘膜亦出现病变。与之相反，家兔、C57和BALB/C小鼠，示能引起Hp的实验性感染。Ehler曾用Lewis大鼠，C57BL/6和BALB/C小鼠做实验，试图建立Hp的动物模型，未获成功。他们的小鼠实验结果与我们的结果相同，都是阴性。但大鼠的实验结果不同。可能是因为实验条件不同的缘故。
自从1983年首先从人胃中分离到Hp以后，相继从水貂和恒河猴的胃组织中分离出Hp样细菌。那么，我们从感染的Wistar大鼠胃组织中分离到的Hp是否亦是自然存在的呢？看来，这种可能性不大。因为，如前所述，未感染的对照组大鼠，用各种方法检测，都没有检查到Hp菌
最近报道悉生仔猪经口感染Hp，可从胃组织中分离出Hp。但用悉生仔猪做实验，不但费用昂贵，而且不方便。根据本实验结果，我们认为Wistar大鼠，尤其是幼龄鼠，是研究Hp菌较为理想的动物模型。但是，多次感染是必要的。

幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori, Hp）的发现被认为在人类胃炎病原学中具有重要的作用，此菌1982年首次发现，由Marshall等所描述并命名为Campylobacter Pyloridis，后来根据国际细菌命名规则（ICNB）改正为C.Pylori。1989年Goodwin等建议把Hp从弯曲菌属划出来，而成立一个新的属，称为幽门螺杆菌（HelicobacterPylori, Hp），目前已在国际性刊物和国际会议上应用此名称。幽门螺杆菌为微需氧菌，地氧较敏感，此菌营养要求高，在普遍蛋白胨水或肉汤中不能生长，在固体培养基上Goodwin（1985）推荐以脑一心浸液琼脂为基础，加入7%马血清，1%Isovitalix(BBL)，万古霉素2mg/L，萘啶酮酸20mg/L，两性霉素2mg/L。该菌最适宜生长温度37°C，42°C条件下则不能生长，37°C下培养，细菌生长缓慢，培养3d～4d后在微氧条件下，固体培养基上可0.5mm～1mm直径灰白色透明的菌落，在血平皿上有时可见菌落周围有轻度溶血，该菌培养时要求温度高，尤其初代分离时，相对湿度至少要在98%以上，为此我们用布氏琼脂液体一固体双相培养基，对幽门螺杆菌的生长曲线进行了研究，现将结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 菌株 幽门螺杆菌89404株自北京市积水潭医院球溃疡病患者的胃粘膜中分离；菌株鉴定结果：氧化酶试验阳性，过氧化氢酶试验阳性。1%甘氨酸生长，马尿酸水解为阴性，37°C生长（+），25°C生长为（－）。在3.5%NaCl中不生长，对庆大霉素、四环素、痢特灵等敏感，对万古霉素抗药，在布氏血琼脂上生长良好，有轻微溶血。 1.2 液体—固体双相培养基的制备取25cm3组织培养瓶，高压来菌后加入6%脱纤维羊血布氏琼脂20ml，平放，待凝固后，将瓶子垂直，再加入新鲜配制的布氏肉汤9ml，置4°C冰箱内保存备用。 1.3 生长曲线的测定 将全羊备注中加89404的菌株自-70°C冷冻保存的幽门螺杆菌融化，取0.2ml菌液接种在6%布氏血琼脂平思虑中，于5%O2，10%CO2，85%N2的混合气体条件下于37°C培养3d后观察，选取新培养的Hp89404用10%小牛血清布氏肉汤（pH7.2）洗下，作1:10稀释，每个尝试各换1支吸管，再经充分混匀后，取10-4及10-5两管进行活菌计数，然后取10-4 菌液1ml(10.15×102cfu/ml)，直接接种在液体—固体双相培养基中，此时按0h培养的菌数计算，即在双相布氏血琼脂培养中，每毫升含菌液浓度为1.02×102/cfu/ml，然后将双相培养物置混合气体培养箱中，经不同时间（24h～144h）在布氏血琼脂平皿上进行活菌数测定。 1.4 pH值测定 将不同时间的菌株液取出，用精密pH试纸测定培养液的pH值，在测定前预备试验用数字式电pH样校正。 2 结果 2.1 幽门螺杆菌在固体培养基上生长特点 在固体布氏血琼脂平皿上，经37°C48h混合气体培养后，用10%小牛血清布氏汤洗下，菌液浓度掃标准比浊管18亿/ml菌配制，按10倍稀释法，取10-4管接种子固体布氏血琼脂上，经37°C72h培养后，菌落计数为1.02×102cfu/ml，同样以10-4接种在双上培养基则为1.14×104cfu/ml，而且在双相培养基上菌形弯曲较固体培养基上典型，球状菌体数量也较少。 2.2 Hp89404在双相培养基上的生长特点 为了解幽门螺杆菌生长特点，选择自胃病患者胃粘膜标本中分离的菌株（Hp89404），采用布氏琼脂双相培养基进行培养，于不同时间各取培养物进行活菌计数，同时还进行pH值测定，实验结果见表1。 表1 幽门螺杆菌（89404）在布氏血双相培养基上生长

生长时间	菌落计数（cfu/ml）	PH值
0	1.02×102	7.2
24	2.50×102	6.9
48	4.97×102	6.9
72	1.14×104	6.8
96	1.24×105	6.6
120	2.87×105	6.6
144	9.75×104	6.4

从附表可见，幽门螺杆菌经培养0～24h，上潜伏期到缓慢生长期，在血双相培养基中，于37°C培养12h～20h开始出现浑浊，24h～48h以后，即可出现迅速对数生长期，并持续到120h，达到生长高峰，此时菌落数最高达2.87×105cfu/ml，以后随着培养时间的延长，菌落单位形成数则渐次下降，在144h时菌数为9.75104cfu/ml。从显微镜下观察菌体形态，培养24h～48h,见菌形呈较为典型的弯曲形、螺杆状或海鸥展翅样，到72h～96h为多形态性，有球状菌形出现。从液相培养液pH测定中24h～144h表明pH上原来7.2下降到6.4～6.9。 3 讨论 幽门螺杆菌的生长营养条件要求较高，胃粘膜培养物在固体培养基布氏血琼脂条件下，经37°C24h～48h微氧培养，细菌生长缓慢，在固体培养基上可见成睛集落细小 的灰白色透明的菌苔，初代培养经镜检形态为典型海鸥展翅样或S形弯曲菌，但经继代培养，特别是72h以后的培养物菌体常可变成多形态性，微球形则尤为多见，用双相培养物菌液均匀混浊，菌生长较快，保存时间相对也较长，这是否由于液体—固体双相培养基，其营养及温度均有利幽门螺杆菌的存活，有待进一步研究。

十余年来，幽门螺杆菌（Helicobacterpylori,Hp）与各种慢性胃病（慢性胃炎，消化性溃疡，胃癌等）之间的关系，基本上已取得了一致认识。可是仍然有许多问题有待解决。例如：Hp的致病及致癌机进、Hp感染的免疫预防治疗问题；抗Hp治疗方案及药物的改进、是否所有Hp感染者都需要用抗Hp治疗等。这些问题的解决除了靠临床资料的累积外，免不了需要在实验动物模型上作更深入的研究。然而，制备与Hp感染有关的慢性胃病的动物模型比较复杂、比较困难，因此尚未能普遍采用。问题在于Hp是一种人类胃部的寄生菌，它并不能在任何动物胃中定居。另一方面许多动物消化道中自然寄生着一些类似于Hp的细菌，这给在实验动物中识别Hp与类似菌造成困难。下面我们来看一看已经发现的Hp类似菌在自然动物中感染情况和已建立的Hp感染动物模型及其应用的现状。

早在19世纪末有在狗、猫、棕色的挪威鼠胃中发现了螺形菌。但未在人、猴、牛、猪、小鼠、鸽子、乌鸦中找到。由于当时仅凭形态学判断，因此这些结果都未能肯定下来。直到1983年Marshall从人胃中分离到幽门弯曲菌（Campylobacter pylori,CP)后，才引起人们注意到此菌与慢性胃病的关系。同时亦引发人们对各种动物胃中类似菌的兴趣。1989年Goodwin对CP作了深入研究后，认为CP不同于弯曲菌属细菌，提出了一个新属名螺杆菌（Helicobacter），并确定Cp是这一属中的代表菌种，称作幽门螺杆菌（H.pylori, Hp）,同时亦把从雪貂胃中分离到的类似菌H.mustelac(Hm)，包括在这一属中，H属最主要的特征是指这一类细菌属革兰阴性、螺旋形、有带鞘的鞭毛。微需O2尿素酶（+）。有特殊的脂肪酸组成等。自此以后，人们从不同种类动物的消化道中发现了不下10余种H属细菌。最早分离到的可能是大鼠和小鼠肠道中分离到的H.muridarum.已知有6种H菌从不同动物胃里分离到。除Hp与Hm外。尚有猫狗中的H.felis(HF)，卷尾猴中的H.nemetrinae，猎豹中的“H.acinonyx”和狗中的H.bizzozero。原来归在Campylobacter属里的与人类胃肠炎有关的类似菌，H.cinaedi、H.fennelliac和H.heilmanii亦已归入此属。“Flexispira rappini”最早是在流产羔羊中分离到的细菌，最近亦在胃肠炎的病-人和小猎兔犬胃中发现。虽然这一细菌表现型上与Hp有差别，但根据产生尿素酶和基因型的特征已归入此属，称作“h.rappini”。除此之外尚有一些在动物下消化道中发现的，例如，引起小鼠肝炎的H.hepaticus等。
在人类或动物胃中除了Hp类似的细菌外，还有一些紧密螺旋形的细菌。例如：人胃中的人胃螺菌“Gastrospirillum bominis”，由于它们尚未能分离培养，对它们的生物学性状尚未充分了解，因此有的尚未正式命名。Henry就曾报告在小猎兔犬的胃粘膜电镜下曾显示三种形态的细菌：第一种是H.rappini，第二种H.felis，第三种是 “G.hominis”，用特探针发现三者有明显的差别。还有一些未曾命名的H属细菌已经在燕鸥、家雀和猪中发现。有人还在雪貂中发现不同于Hm的H属细菌。在这同时亦有人报道从猴类动物及猫中直接分离到Hp。由此可以想像研制Hp感染动物模型的复杂性。

1983年后许多学者企图在常规实验室动物包括小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、无菌（Germ Free,GF）级无菌大鼠中用口服攻击法建立Hp感染的动物模型，结果均未成功。1987年krakowka考虑到猪的杂食性及其胃的解剖结构生理功能与人类相似，另一方面为了尽可能避免有可能干扰Hp感染成功的种种因素，他们成功地用GF级小猪口服接种Hp，建立了Hp感染的悉生（kontbiotic)动物模型。他们除了在此动物胃中重新分离到Hp外，亦观察到了由Hp感染引起的类似于人类感染Hp后引起的疾病的特征。接着亦有人用无特种病（specific-pathogen-free）,SPF）级的小猎兔犬中用口服Hp，亦建立了悉生犬类动物模型。由于建立较大型动物的悉生动物模型条件较困难，较难于推广应用。有人企图口服接种Hp于GF级的BALB/c小鼠和GF级的Sprague-Dowley大鼠建立动物模型，但未能成功。后来Lee用HF接种于GF级的Swiss Webster小鼠，2周内出现了急性炎症反应，3周后转为在人类感染Hp后出现的类似的慢性炎症过程。由此，第一次在小动物中建立了类Hp感染的悉生动物模型。1992年Karita用BALB/c裸鼠口服接种Hp获得成功。用这一裸鼠的动物模型，不仅能维持20周，而且能观察到胃炎、十二指肠炎及所有感染动物中所能观察到的一切病理学证据。雪貂是一种产于北美、北欧、与南太平洋地区的动物。它的胃的解剖生理学特征与人类相似，且饲养管理较方便，价格并不很贵。成年貂几乎100%感染了HM（它的生物学特性与Hp近似），且亦能引起胃炎、溃疡等病变及相关的免疫反应。因此，Fox推荐亦可把它用作替代Hp感染的动物模型。尽管前面已经介绍了几种不同类型的动物模型，但是迄今仍然可以说尚没有能普遍被接受。因为由GF级动物制成的动物模型，不仅需要有昂贵的设备的设备条件、复杂的饲养管理、操作手段。因此用这类动物模型亦仅能解决某些特定条件下的问题。裸鼠也是一种有免疫缺陷的小动物，饲养管理当然比GF级动物容易一些，但由于较小，实验观察亦有它有便的地方。而且它只对Hp的新鲜分离株敏感，对实验室株不敏感。有Hm和Hf株建立的动物模型，尽管与Hp感染相似，但毕竟不是Hp，因此用这类细菌感染的实验动物亦有它的局限性。Dubois等根据现有的文献资料通过表现型与基因型分析从恒河猴胃中分离到Hp样细菌与人类的Hp高度同源，因此观察了26只族群繁殖的猴群的自然感染史，取胃粘膜活检作病理切片及细菌分离培养。发现13只感染了Hp，9只感染了（G.hominis样细菌，GHLO），其中3只兼有两种细菌。而4只未感染上述两种细菌，未感染和只感染了GHLO的动物中胃炎的比数≤1:5，在所有感染了Hp的动物中胃炎的比数≥2.0。在13只Hp感染的动物中有12只具有相应的IgG，13只Hp阴性的动物中仅有2只具有IgG比例≥0.5（P＜0.001）。在实验观察期间，一只猴子感染上了Hp，同时发生胃炎和血浆IgG水平的升高。在未感染的动物中，感染胃炎、血浆IgG水平保持7～15个月不变，在6个月时6只猴子用三联疗法根除了Hp，随之降低了胃炎和血浆IgG的浅水水平。Dubols从他的实验中认为隐匿Hp的恒河猴伴有持续的感染、胃炎及特异性抗体水平的升高。所有这些都对适当的治疗作出反应。而GHLO感染很少有炎症相伴，因此提出自然感染Hp的恒河猴亦可作为人类Hp感染的动物模型。

3.1 抗Hp疗法疗效研究 在前述Dublos用自然感染Hp的恒河猴做实验。不仅证明了它可以用作Hp的动物模型，亦是用Hp感染动物模型研究抗Hp疗法疗效的典型例子。他在第一个试验中用溶介在Tang溶液中的Amoxicillin+Metronidazole+BismuthSubsalicylate给6只恒河猴、2只感染Hp，4只感染GHLO治疗4周。在两组中均未观察到可以检测到的变化。作者的结论认为这一疗法对根除Hp毫无疗效。在另一试验中，同样药物对6只恒河猴每天胃内给予2次，连续10d，在第5d和1个月时都已证明清除了细菌，2个月后有2只猴子又发现了Hp感染表明可能是复发或再感染。其他4支动物直到治疗后6月仍然保持阴性，由此被认为，感染是被根除了。3个动物在治疗前也有GHLO感染，治疗5d后GHLO转为阴性，但是，一个月后，3只动物重新发现GHLO感染的证据。在第3个月时，另一个动物也出现GHLO。直到第5和第6个月时，所有4个猴子虽然都清除了它们的Hp感染，但增保持了GHLO的感染。治疗后一月胃炎程度比开始时下降，在4个根除Hp的恒河猴中的胃炎比≤1.0，而在2个复发Hp感染的动物中胃炎比恢复到＞2.0。经过治疗后在Hp根除的动物中血浆IgG比例逐渐下降。在2个未根除Hp的动物中保持不变。由此，它像在人类中一样，根除Hp后，胃炎和免疫抗体逐渐消失了。
3.2 在研究Hp致病机理方面的应用Eaton等用来自四窝23只悉生小猪以有动力和无动力的Hp株攻击。发现动力最强的感染率最高，达100%，动力最弱的感染率最弱，仅有17%，动力居中间的感染率达40%，从悉生小猪分离的Hp，动力比攻击株更强，攻击株产生的细胞毒素亦不相同，动力最弱的株产生最小量的细胞毒素，而其他两株均产生较高水平的细胞毒素，而其他两株均产生较高水平的细胞毒素。由此，悉生小猪中Hp的毒力与动力相一致，而与细胞毒素的产生不完全一致。
Tsuda等从病人身上分离到的Hp野生株CPY3401，用一个耐卡那霉素的决定簇基因插入到其尿素酶的基因中，使其变成一个无尿素酶活性的Hp突变株Hp173。然后，用CPY3401与Hp173两个同源株去攻击裸鼠，企图证明尿素酶的致病性。结果在CPY3401攻击的胃出现了胃炎，且由此动物分离到的Hp与原来攻击株地区别。而Hp173攻击的动物不发生胃炎，而且不能分离到Hp在裸鼠胃中定居的重要因子。
3.3 在研究免疫反应中的应用 为了说明Hp尿素酶亚单位作为粘膜免疫原的效率。Ferrero等用相当与Hp和Hf的尿素酶亚单位（UreA和Urab）编码基因克隆到表达载体（pMAL）中去使大肠杆菌表达出转译的合成蛋白质。重组的UreA和UreB蛋白质与粘膜佐剂（霍乱毒素、CT）结合，经口免疫小鼠。然后取胃粘膜活检作尿素酶试验和病理组织学检查。结果证明不管是同源性还是异源性的UreA均能在小鼠中引起抗HF感染的保护性反应。Ferrero认为通过本实验能证明重组亚单位抗原能引起抗H属细菌感染的免疫保护反应。
Lee为了确定低剂量的CT或它的B亚单位（CTB）在H属细菌口服疫苗中作为一个佐剂是否有效。他在下述三组免疫的APF级BLAB/c小鼠中完成对活的HF攻击的明显的保护作用。①HF抗原+0.5μgCT和10μgCTB(96%)；②HF抗原+0.5μgCT(45%)；③HF抗原+10μgCTB(85%)。单独用HF抗原或单独用佐剂免疫小鼠无任何保护作用。用HF抗原+10μgCT免疫小鼠对HF攻击只有26%的保护作用。这预示无毒的CTB佐剂将可用于人类的免疫中。

1983年,Warren和Marshall在患慢性胃炎和消化性溃疡病人的胃粘膜中发现一种弯曲状细菌。现称之为幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori, Hp）。此后，各国学者相继进行了大量的研究。证明幽门螺杆菌很可能是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病菌。据报道幽门螺杆菌感染悉生仔猪获得成功，表明猪可能是一种敏感动物。那么，在自然条件下，猪是否有幽门螺杆菌的感染并并发胃粘膜的病变呢？为此我们对正常猪胃做了微生物学和病理组织学检查。结果发现在猪胃粘膜中存在有螺杆菌样细菌（Heliocbacter-like organisms,HlO）其形态和某些生物学性状与幽门螺杆菌基本相同，而且HLO阳性的猪胃粘膜，呈现与人慢性胃炎相似的病理变化，现将结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本来源 猪胃10个,从北京沙河肉联厂新屠宰的健康猪中随机取出,有70%酒精消毒后沿胃大弯剪开,清除内容物用无菌操作分别从胃窦、胃底和胃体部剪取胃粘膜组织各4块，其中2块用缓冲的10%福尔马林固定，供病理学研究，另2块组织供细菌培养用。 1.2 螺杆菌培养 将从胃窦、胃底和胃体部取得的粘膜组织，分别置于无菌玻璃研磨器中，加0.5ml含10%小牛血清的布氏肉汤，研磨成匀浆后，取0.1ml接种于含6%羊血的布氏培养基平板中，放置于混合气体（10%CO2，5%O2，85%N2）培养72h后观察结果。另取胃粘膜匀浆一小滴于载玻片上，推片凉干用甲醇固定，0.3%复红染色后，直接镜检。 1.3 全菌蛋白电泳分析 用SDSPAGE技术，对幽门螺杆菌（菌株号为NCTC14126，CAPM00112-5），空肠弯曲菌（菌株号为Cj22，Cj26，流G15），结肠弯曲菌（菌株号CC29）和分离到的猪胃螺杆菌作了全菌蛋白电泳图谱的比较。实验条件为浓缩胶5%，分离胶11%，各菌体蛋白样品20μl+2×buffer20μl 100°C水浴5min且加样，50V恒压2h时，75V恒压12h，考马斯亮蓝R-250染色。 1.4 药敏试验 抗菌药物敏感试验所用试纸，系由大连生物试剂厂生产，被试菌株为猪胃螺杆样菌37°C48h培养物，用0.1%胨生理盐水洗下，制成2×109cfu/ml菌液，取0.1ml菌液均匀涂于布氏培养基表面贴药敏试纸7张，然后置于混合气体培养箱中，孵育48h～72h，测量抑菌圈直径。 1.5 病理学检查 经福尔马林固定的组织标本，用石蜡包埋作5μ厚度的切片，每个标本4张。2张用苏木素一伊红染色，作病理组织学观察；另2张用Warthin-Stsrry镀银染色，检查弯曲菌。 2 结果 2.1 猪胃螺杆样菌的分离 在10例猪胃标本中，有8例分离到HLO。若按不同部位猪胃粘膜的分离阳性率来看，以胃底部为最高（8/10），其次为胃窦部（4/10），胃体部最低（3/10），结果见表1。猪胃HLO的菌落较小，约0.5mm～1mm直径，呈圆形、扁平、湿润、半透明，偶或可见菌落周围有β微溶血。菌体较纤细着色良好，呈弧形，S形或海鸥展翅状。其中第5例标本，除典型的弯曲菌外，还发现一种螺旋状菌，该菌螺旋较致密，螺旋数由数个至十数个不等，其形态与从猫中分离的螺旋菌十分相似。 2.2 幽门螺杆菌与猪胃螺旋杆菌的生化特性 我们将分离到的猪胃HLO，包括致密螺旋菌与幽门螺杆菌做了生化特性的比较，结果见表2。如表2所示，猪胃HLO，除尿素酶试验较迟缓外，其他各项生化反应均与幽门螺杆菌一致，而猪胃致密螺旋菌除尿素酶试验较迟缓外，H2S产生为阴性。 2.3 全菌蛋白的电泳图谱分析 两株幽门螺杆菌（NCT11637，CAPM112）的电泳电谱相似；空肠弯曲菌（Cj22,Cj26,流G15）和结肠弯曲菌（CC29）的图谱相似；各株猪胃HLO（6B，6C，7B，7C，10B，10C）之间的图谱亦相似，但明显不同于Hp与空肠弯曲菌的图谱。从同一动物不同部位分离的猪胃HLO，其图谱相同，而从不同动物分离的猪胃HLO，其全菌蛋白图谱有微细的差别。 2.4 药敏试验 猪胃HLO（1a,9a）的药敏试验结果表明，这些菌株对呋喃唑酮、红霉素、氯霉素和庆大霉素均敏感，而对羟氨苄青霉素、先锋霉素、萘啶酮酸等耐药。 2.5 病理组织学研究 在10例猪胃标本的组织切片中，有7例检查到螺杆样细菌（表1），这些细菌往往成群或散在地存在于粘液层，粘膜上皮表面或粘膜腺体内。这些细菌，有的呈弧形，有的呈S形，其形态与在慢性胃炎病人胃粘膜中所见到的幽门螺杆菌十分相似。这7例细菌阳性的胃粘膜组织都呈现中等度到较严重的慢性炎症病灶，主要表现为粘膜和固有层大量的单核细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润，间或有少量嗜伊红细胞和多形核白细胞浸润。有些病灶伴有淋巴滤泡形成。有意义的是这些病变，只见窦部和底部的粘膜而胃体部组织则无一例出现上述病变（表1）。 表1 猪胃粘膜HLO培养和病理组织检查结果

标本编号	胃粘膜肉眼观察	HLO培养结果			慢性炎症病变			组织切片检检菌
		胃底	胃窦	胃体	胃底	胃窦	胃体
1	正常	+	－	－	+	+	－	+
2	正常	－	－	－	－	－	－	－
3	正常	+	－	－	+	+	－	+
4	正常	+	+	－	+	+	－	+
5	正常	+	－	－	+	+	－	+
6	充血，点状出血	+	+	+	+	+	―	+
7	充血，点状出血	+	+	+	+	+	―	+
8	正常	－	－	－	－	－	―	―
9	正常	+	－	－	－	－	－	－
10	正常	+	+	+	+	+	－	+

表2 幽门螺杆菌与猪胃中HLO的生化反应比较

菌 株	氧化酶	过氧化氢酶	葡萄糖发酵	H2S产生	马尿酸水解	0.5% NaCl	0.5% NaCl	尿素酶试验
幽门螺杆菌NCTC11673	+	+	－	+	－	+	－	+（4h）
猪胃弯曲菌7a	+	+	－	+	－	+	－	+(36h)
猪胃密螺旋菌WL5a	+	+	－	－	－	+	－	+(24h)

3 讨论 在某些哺乳动物的胃粘膜中，也曾发现有幽门螺杆菌样细菌，但除雪貂外，一般不引起病变。我们从在自然条件下生长的普通猪胃中分离到螺杆菌样细菌，而且阳性率相当高（80%）。猪胃HLO的菌落和菌体形态与Hp十分相似，某些生化反应特性两者形态也基本一致，但HLO的尿素酶活性较低。SDS-PAGE全菌蛋白图谱表现猪胃HOLO和Hp的图谱差别也较明显。两者的种属关系如何有待进一步研究。在HLO培养阳性的8例猪胃中，有7例在其组织切片中发现为数较多的HLO，同时伴有慢性胃炎病变。就其病变的性质而言，与人的慢性胃炎基本相同，但是，其发生病变的范围较广，累及窦部和底部，而与Hp感染相关的人的慢性胃炎，多发生于窦部，正常猪出现胃炎病变，看来产不少见，例如Kathryn在其作为对照组的某些猪的胃组织中曾观察到慢性炎症病变，对此作者未作解释。猪的胃肠系统在解剖学和生理学上类似于人类，而且近来在人和猪的胃组织中均检查到甘油脂（glycero lipid），后者被认为是胃粘膜上的幽门螺杆菌的受体。 综上所述，我们认为猪胃HLO与猪慢性胃炎的关系，犹如Hp与人慢性炎的关系。在Hp不易感染其他动物的情况下，研究HLO对猪慢性胃炎的致病作用，或将有助于阐明Hp对慢性胃炎和消化性溃疡的致病机理。鉴于猪能自然感染螺杆菌样细菌并有慢性胃炎，因此用猪做幽门螺杆菌感染试验，在分析结果时应审慎。

由于幽门螺杆菌（HelicobacterPylori,Hp）具有很强的尿素酶活性，导致Hp感染患者胃液中的氨浓度明显增高。这种增高的氨对胃粘膜的影响目前尚未见报告。本实验使用Hp阳性例胃液中所测平均浓度0.01%及较高值.02%的氨水长期饲养大鼠，探讨了氨对胃粘膜屏障功能的影响 。本文就其对胃粘膜血流、胃粘膜电位差（potential dif ferece,PD）及胃粘膜前列腺素（PG）的影响报告如下。
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组 本实验选用250～300g的Wistar系雄性大白鼠150只，随机分成3组，以自由饮水和形式分别饮用自来水、0.01%和氨水和0.025的氨水。每组分为1个月、3个月和6个月饲养组，即0.01%的氨水1个月饲养组，3个月组，6个月饲养组；0.02%的氨水1个月组，3个月饲养组，6个月饲养组及相应月份的自来水对照组，共计9组。隔日换一次自来水、0.01%及0.02%的氨水。
1.2 胃粘膜血流的测定法 本实验胃粘膜血流的测定是肛用吸及式氢气清除率法。使用日本UniqueMedical公司产的pHG-201型氢气清除率式组织血流计和UHE-201型血流测量电极。每组取大白鼠5～10只，禁食24h后腹腔注射乌拉坦麻醉下开腹，将测量电极从大白鼠胃的浆膜侧刺入，参堦电极连接鼠尾，分别测定胃中前壁及幽门前壁的胃粘膜血流。
1.3 胃粘膜PD的测定法 每组各取大白鼠5～10只，禁食24h后，腹腔注射乌拉坦麻醉下开腹，从膜胃部开一小口，把自制琼脂PD测定电极置于胃粘膜面将参比电极置于对应的浆膜面，用数字式毫伏表分别测定胃体前壁及幽门前壁的胃粘膜电位差。
1.4 胃粘膜PG的测定法 每组取大白鼠5～10只,禁食24h后，将各组大白鼠断头致死，迅速在冰水中取出全胃，分别从胃体前壁及幽门前壁剪出0.5cm×0.5cm左右的胃组织块，立即放入事先装有EDTA-2Na、消炎痛（tndomethacinum）和抑肽酶（trasylol）的专用试管内，然后以RLA（PEG）法测出胃组织中的前列腺素。
1.5 统计学处理 采用多因素多个均数间的两两比较法。
2 结果
2.1 胃粘膜血流 与对照组比较，实验胃体、幽门部胃粗膜血流匀有减少趋势，而且氨水浓度越大血流越小。3个月后胃体部0.02%氨水组的胃粘膜血流79.4±10.27ml/(min.100g)，与同月对照组的123.74±16.11ml/min.100g)相比，差异非常显著（P＜0.01）。
2.2 胃粘膜PD 1个月时，3组胃粘膜PD无明显差异，此后随着饲养时间的延长实验组的PD无减少，其中尤以胃体部的变化更明显。3个月时两实验组与对照组相比均有非常显著的差异，并且0.01%的氨水组与12个月对照下降显著。
2.3 胃粘膜PG 3个月后胃体部、幽门部实验组办粘膜PG均有增高趋势，6个月后与对照组比较明显减少，6个月后幽门部0.02%氨水组胃粘膜PG34.24±19.32pg/(mg.min)，与相应对照的65.6±12.55pg/(mg.min)比较，明显减少（P＜0.05）
3 讨论
胃粘膜具有对抗H+侵蚀的防御机构。这种阻止H+再吸水的生理机制，被称为胃粘膜屏障。胃小膜屏障系由胃粘膜上皮细胞及其分泌的粘液层两种成分组成。即胃粘膜屏障可分为粘液屏障和粘膜细胞屏障，将胃的粘膜面做负极，将膜面做正极，就会在其间产生约30mV的电位差，称为胃粘膜PD。新的认识，认为膜电位差PD下降即是粘膜屏障受损伤的标志之一。粘膜血供因素在清除过量的H+反扩用，维护粘膜屏障功能上，极为重要。胃泌素、前列腺素等体液调节因子，也是参与调节胃粘膜屏障功能和重要体液因素。
胃粘膜屏障可由药物等物理或化学因素而被破坏。自从发现Hp与慢性胃炎及消化性溃疡有着密切关系后，目前有人已主张将Hp列入胃粘膜攻击因子。Hp具有较强的尿素酶活性，可命名来自血液中的尿素及来自食物中的尿素分解产生过量氨。就氨水对胃粘膜屏障功能的影响国外已有人进行了一些急性试验，如村上等将0.1%,0.5%，1%的氨水分别直接注入大鼠的胃内，发现胃粘膜电位差显著降低。1%氨水注入后胃粘膜血流先增加随即显著性减少。但以往的急性实验使用的氨浓度都较高，实际上Hp慢性患者胃液中的氨浓度只有0.01%左右，与1%比较相差百倍，且Hp长期存在于胃粘膜上，所产生的氨也必然会成为一处长期刺激因素。本实验采用临床上所测出的Hp慢性患者胃液中的氨浓度，观察这种低浓度的氨水对胃粘膜慢性作用的影响。发现饲养3个月后，无论0.01%还是0.02%的氨水，均可使PD明显减少，其中胃体部的减少更加显著，几乎降至对照组的1/2。饲养1～6个月以后氨水组胃粘膜血流均比对照组为少，而且0.02%氨水组的血流量更小，3个月时0.02%氨水组胃体部的血流量与对照组相比差异非常显著。PD的下降和粘膜血流的减少标志着粘膜屏障的防御能力受到破坏，从而导致大量的H++反扩散，H+进入胃粘膜，Na+则反流至胃腔内，致使胃粘膜发生一系列病理生理的改变。本实验组织学上发现形成了萎缩性胃炎和胃溃疡，我们考虑与氨水导致的粘膜屏障破坏有着直接的关系。由胃粘膜上皮细胞不断合成和释放的内源性前列腺素具有抑制胃液分泌、抗溃疡和细胞保护作用。PG减少时，其细胞保护作用减弱，就会使粘膜的“粘液——碳酸氢盐”屏障受损，引起氢离子逆扩散，破坏物现性保护作用，破坏上皮细胞的完整性，使溃疡易于形成。本实验氨水饲养3个月时，胃粘膜PG均有增高趋势，6个月时与对照组比较明显减少。3个月时PG的增加可能是因为氨水对胃粘膜长期的弱刺激，促使胃粘膜增强PG的合成和释放，以完成其适应性保护作用。6个月时由于氨水导致了大白鼠的萎缩性胃炎，使表面上皮层萎缩，上皮细胞减少及表面上皮脱落破坏，使PG明显减少。这可能是导致胃溃疡的一个重要因素。
本实验结果表明：Hp阳性例胃液中所测浓度的氨水长期作用于胃粘膜，可导致胃粘膜血流和PG减少，PD降低，即可破坏胃粘膜的防御机能。可以推论，由Hp分泌的尿素酶所分解产生的作用，可能是Hp破坏胃粘膜屏障的功能、产生慢性胃炎和胃溃疡的一个重要因素。
本实验选用的是Hp阳性例胃液中测出的氨浓度，Hp实际存在于病变胃粘膜之粘液层下，附着在粘膜上皮细胞上或集中于上皮连接处。因此实际上存在于粘膜上及细胞间隙氨的浓度，目前尚不清楚。另外大白鼠的胃粘膜虽然与人有很多相似之处，但能否用本研究的结果，去具体解释Hp阳性例临床问题等还都有待进一步研究和探讨。

人胃螺旋菌(Gastrospirillumhominis,GH)是近来人们认识到的除幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）外的另一类与人胃炎有关的微生物，国内报道人群感染率明显高于国外。由于目前国内外对GH尚未分离培养成功，对Gh的研究仅限于组织学及形态学观察，影响了对Gh本身及其致病性方面的深入认识。我们自一接受胃镜检查的病人中，观察到有Gh和Hp混合感染存在，并最终纯化分离到了Gh和Hp。在对Gh的传代培养中，我们较系统地观察了不同培养条件及冷冻保存对其形态等的影响。现简要报告如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源
实验标本来源于一位在首都医学院附属天坛医院接受胃镜检查的50岁的男性病人，病理学检查证实其胃粘膜是中度慢性浅表性胃炎伴中度活动性胃炎表现。胃镜检查时在胃窦部钳取胃粘膜组织2块，置于含10%小牛血清的布氏肉汤中，放于4°C保存4d后进行以下实验。
1.2 胃粘膜组织尿素酶试验
参考Christensen尿素肉汤培养和Morris等快速诊断法，采用2%液体尿素常规法，于4h及24h观察结果。
1.3 细菌分离培养及纯化
在灭菌研磨器中将胃粘膜组织研磨成匀浆，涂于含6%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板（含TMP5mg/L，万古霉素6mg/L及多粘菌素B4mg/L）中，将平板置于含10%CO22、5%O2及85%N2的混合气体培养箱中，37°C培养3d后涂片，在光镜下观察培养结果。在含10%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中进行Gh菌单菌落纯分离，并测定其尿素酶、氧化酶及过氧化氢酶活性。
1.4 不同培养条件下Gh生长情况
①将纯化的Gh菌分别接种于含6%与10%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中，置混合气体环境，37°C培养3d，涂片检查细菌形态。②将纯化的Gh菌接种于含6%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中，局部分别滴加灭菌的布氏肉汤、新鲜脱纤维绵羊血及冻融脱纤维绵羊血，并分别加盖一片灭菌的盖玻片，使覆盖部位呈厌氧状态。放37°C培养3d，观察细菌菌落生长情况及涂片观察细菌形态。③将纯化的Gh菌接种于含10%小牛血清的布氏肉汤小管中（管口加灭菌绵塞），放混合气体环境，37°C培养3d后，直接涂片及离心沉渣涂片观察细菌形态。④将置于保存液（含10%蔗糖和50%小牛血清）中，-70°C保存30d后的Gh菌，接种于含10%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中，37°C培养3d后，观察菌落生长情况、涂片观察细菌形态、测定其尿素酶、氧化酶和过氧化氢酶活性，并继续传代观察其形态变化。
2 结果
胃粘膜组织尿素酶试验4h及24h均为阴性。细菌初代培养物涂片发现含有Gh和Hp两种菌。经单菌落分离分别得到Gh和Hp菌的纯培养，其中分离到的Gh菌株命名为Gh32。对Gh32的测定发现其氧化酶与过氧化氢酶均为阳性。并含有很强的尿素酶活性。Gh32在含有6%脱纤维绵羊血的布氏培养基上生长较差，菌落呈针尖状。光镜下可见细菌呈球形、肾形及短螺旋形，多数菌仅一个弯曲。在含10%脱纤维绵羊血的布氏培养基上生长良好，可长成1mm～2mm直径单个菌落，光镜下可见细菌呈多螺旋状，螺旋数目在1～6个之间，且螺旋较密。Gh32在盖玻片下生长不良；在滴加布氏汤和未滴加任何液体的对照部位，细菌菌落较小，呈针尖状。在滴加新鲜血或冻融血而未被盖玻片覆盖处，菌落形态及光镜下细菌形态与在含10%脱纤维绵羊血布氏琼脂平板上生长的情况相似。Gh32在液体培养时生长较慢，3d后液体仅轻度混浊，涂片发现细菌数目较少，但菌形良好，螺旋数在3～14个不等，长度可达17μm左右。经3，000r/min（台式离心机上）离心3min后沉渣用少许生理盐水悬浮涂片发现，多数细菌螺旋数在4～6个左右。将低温保存Gh32初代复活时，菌落生长良好。酶活性检查发现，其尿素酶、氧化酶及过氧化氢酶均为阳性。涂片发现几乎所有菌体均发生了球形变。连续传代2次后，70%左右恢复典型形态，连续传代3次后细菌几乎全部恢复其典型形态。
3 讨论
人们对胃螺旋菌的认识已有一个较长的历史过程。早在1881年Rappin就报道在狗胃粘膜中观察到螺旋形细菌的存在，此后又有许多在其它哺乳动物胃粘膜中观察到螺旋形细菌存在的报道。1906年Krienitz首先观察到人胃粘膜中有3种不同类型的弯曲或螺旋细菌存在，但此后胃螺旋菌未能引起人们的足够重视。随着对幽门螺杆菌与胃炎及消化性溃疡的关系的深入研究，人们开始重新对人胃螺旋菌进行认识。目前认为此菌可能为除Hp外的又一类与胃炎有关的细菌。自1987年来世界各地已有近百例有关Gh感染的报道，国内杨海涛等也曾报道14例Gh感染病人。人们自猪等动物已成功地分离到了胃螺旋菌，近年来国内外多位学者曾对Gh进行分离培养，但至今未见有关Gh培养成功的报道，对Gh的研究也仅限于对病理组织学的观察。我们自人胃粘膜组织中成功地分离到一株Gh，为对Gh的深入研究创造了必要条件。
虽然目前我们只分离到一株Gh菌，可能不能完全反映所有Gh菌所需要的培养条件，但我们在实验中观察到了Gh菌形态的易变性。在不同培养条件下，Gh可呈1～14个螺旋不等，甚至呈肾形或球形。Gh在培养条件不完全适合时，不能表现出其典型形态，而胃粘膜标本中往往有多种细菌存在，在选择性培养基上也可能不止有一种细菌生长，对形态不典型的Gh菌，很容易被当成杂菌或Hp菌处理。我们在分离猪胃螺旋菌(Gastrospirillumsuis)时也曾发生类似情况，一度将一株猪胃螺旋菌作为幽门螺杆菌样细菌（Helicobacter pylori like organism,hpLO）处理过，后来在半固体及液体培养时才观察到其典型形态。Gh在人群中的感染率相对较低（仅1%左右），更增加了Gh分离培养成功的难度。我们认为以上因素可能是造成以往分离培养Gh失败的主要原因。这提示人们，在作Gh分离培养时，如观察到可疑Gh菌存在时，应增加培养基中含血量或进行液体培养，以便使Gh表现出其典型形态。由于Gh在固体培养基中菌形较短，而在液体培养时，虽菌形良好，但菌量较少，有关Gh的最适培养条件问题，仍需进一步探讨。
实验表明，Gh为微需氧菌，氧化酶和过氧化酶均为阳性，且有很高活性的尿素酶，而在胃粘膜组织直接尿素酶活性检测时则为阴性，这可能与胃粘膜中Gh菌量较少有关。提示胃粘膜组织尿素酶阴性的依据，也不能反映Gh产生尿素酶活性的强弱。
实验发现本病人胃粘膜中有Gh与Hp混合感染，两菌同时感染的机会较少，目前仅有数例报道。病人经组织学证实胃粘膜呈中度慢性浅表性胃炎伴中度活动性胃炎表现。Gh在胃炎发生过程中所起的作用如何，有待进一步研究。Gh的传染和传播途径问题、Gh与猪、狗、猫胃螺旋菌间的关系，以及在胃内这一特定微生态环境中Gh与Hp的关系等均有待于进一步探讨。Gh的培养成功，使对这一系列问题的研究成为可能。

幽门螺杆菌（简称Hp）与人类慢性胃炎的病因关系，已为多数学者承认，且动物不受其感染。1987年，Dent等从人胃内发现另一种与Hp不同的螺旋状微生物，同时伴有慢性活动性胃炎表现，但其致病性尚未肯定，1989年,McNulty等建议将其命名为“人胃螺旋菌”Gastrospirillum Hominis,简称Gh）。国内迄今尚未见有关报道，最近我们在对Hp的研究中，从1例残胃患者胃内发现了此菌，现报告如下。
1 病例报告
患者男，68岁，太原市人。1963年因上腹部疼痛经上消化道造影诊断为胃溃疡。1975年行胃大部分切除及胃空肠吻合术。术后诊断为复合溃疡。术后患者间断出现上腹剧痛、呕吐，偶觉烧心，有时吐胆汁。1986年10月首次胃镜检查，吻合口充血，有胆汁返流。患者嗜烟，每日10支，近10年来养有一猫，但接触不甚密切。查体：一般情况好，心肺正常，肝脾不大，上腹无压痛。1990年5月胃镜随诊：食管下段充血，有胆汁返流，吻合口及残胃体充血水肿，胃底色泽正常。胃液外观呈黄绿色，pH6.3，胆汁酸浓度135.9μmol/L。病检吻合口呈重度浅表性胃炎，有大量中性白细胞浸润。Warthin-starry及Wright-Giemsa染色可见一种与Hp不同的大的螺旋状微生物，长4～8μm，宽0.5μm，有3～7个紧密螺旋，两端钝圆。着色较Hp浅。改良Goodpusture染色呈紫红色，尿素酶试验阳性。该菌成群或单个分布于胃小凹、上皮细胞表面和粘液之中。细菌密集处有大量中性白细胞浸润，并可在胃小凹内见到该菌与脓细胞并存。在壁细胞内、腺腔底部和间质中未见该菌存在。口服庆大霉素治疗，每次8万U，每日2次，连服20d。停药两个月后再次胃镜复查，病检吻合口炎细胞浸润程度明显减轻，偶见中性细胞浸润。Gh消失。对患者1975年手术切除胃窦及1986年胃镜活检组织存档蜡块重新切片检查，均未发现有Gh存在，而在1975年手术切除胃窦及1986年胃镜活检组织存档蜡块重新切片检查，均未发现有Gh存在，而在1975年手术切除胃窦标本上发现有大量Hp存在，同时伴有慢性活动性胃炎。
2 讨论
从本例患者胃内检出的螺旋状微生物，其形态特征与Hp有根本区别，而与Dent等在人胃内所见的Gh相同。此类细菌，在哺乳类动物胃内广泛存在。1987年，Dent等在3例患者胃中发现此菌，到1989年，他们共检出6例，同时Dye等也报道2例。上述8例，连同本例共9例患者均伴有慢性活动性胃炎。
本例特征：①原胃窦切除标本呈慢性活动性胃炎，有大量Hp存在。术后残胃Hp转阴。1990年发现残胃炎伴Gh阳性，但未见Hp与Gh同时并存。②术后胃酸分泌减少，胃液呈中性，是大量胆汁返流，伴返流性食管炎。③Gh和慢性活动性胃炎同时并存。④经庆大霉素治疗后Gh消失，胃炎好转。
Gh为革兰阴性菌，尿素酶试验阳性。电镜可观察到有光滑的细胞壁，菌体两端钝圆，每端有8根直径为28nm的带鞘鞭毛，无轴丝。与上皮细胞接触不紧密与猫螺旋菌有交叉抗原性。除在鼠胃内接种成功外，体外培养均未成功。Gh的感染率远较Hp低，约为0.4%。我们在137例患者中检出一例。Munulty和Dye对Gh阳性患者的存档胃粘膜标本进行了回顾性检查，未发现有Hp感染。而本例患者存档的胃粘膜标本未见Gh，但HP阳性，此点与其结果不同。报道的8例患者中5例伴食管炎，但食管粘膜活检未见Gh。他们应用抗菌治疗3例患者，其中2例Gh转阴，一例Gh明显减少，胃粘膜组织像转为正常或明显好转，与本例结果相同。由于例数太少，目前尚难肯定Gh与慢性胃炎的病因学关系，其分类学地位亦待进一步研究。