第三篇 排泄物和分泌物检查

正常粪便主要由消化后未被吸收的食物残渣、消化道分泌物、大量细菌和无机盐及水等组成。
粪便检查的主要的目的是：①了解消化道有无炎症、出血、寄生虫感染、恶性肿瘤等情况；②根据粪便的性状、组成、间接地判断胃肠、胰腺、肝胆系统的功能状况；③了解肠道貌岸然菌群分布是否合理，检查粪便中有无致病菌以协助诊断肠道传染病。

粪便标本的采取直接影响结果的准确性，通常采用自然排出的粪便，标本采集时注意事项如下：
1．粪便检验应取新鲜的标本，盛器在洁净，不得混有尿液，不可有消毒剂及污水，以免破坏有形成分，使病原菌死亡和污染腐生性原虫。
2．采集标本时应用干净的竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处以材，其量至少为指头大小。
3．标本采集后应于1小时内检查完毕，否则可因PH胶消化酶等影响导致有形成分破坏分解。
4．查痢疾阿米巴滋养体时应于排便后立即检查。从脓血和稀软部分取材，寒冷季节标本传送及检查时均需保温。
5．检查目本血吸虫卵时应取粘液、脓血部分、孵化毛呦时至少留取30克粪便，且须尽快处理。
6．检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱裂处拭取并立即镜检。
7．找寄生虫虫体及作虫卵计数时应采集24小时粪便，前者应从全部粪便中仔细搜查或过筛，然后鉴别其种属；后者应混匀后检查。
8．做化学法隐血试验时，应于前三日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂及维生素C。
9．做粪胆原定量时，应连续收集3天的粪便，每天将粪便渴匀秤重后取出允20克送检。
10．做细菌学检查的粪便标本应采集于灭菌有盖的容器内立即送检。
11．无粪便排出而又必须检查时，可经肛门指诊或采便管拭取标本，灌肠或服油类泻剂的粪便常因过稀且渴有油滴等而不适于做检查标本。
12．粪便检验后应将纸类或塑料标本盒投程度焚化炉中烧毁。搪瓷容器应泡于消毒液中（如过氧乙酸、煤酚皂液或新洁尔灭等）24小时，弃消毒液后，流水冲洗干净备用。所用载上玻片需用5%煤酚皂液浸泡消毒。

（一）量
正常成人大多每日排便一次，其量约为100-300克，随食物种类，食量及消化器官的功能状态而异。摄取细粮及肉食为主者，粪便细腻而量少；进食粗粮特别是多量蔬菜后，因纤维质多致粪便量增加。当胃、肠、胰腺有炎症或功能紊乱时，因炎性渗出，肠蠕动亢进扩消化吸收不良，可使粪便量增加。
（二）外观
粪便的外观包括颜色与性状。正常成人的粪便出时为黄褐色成形便，质软；婴儿粪便便可呈黄色或金黄色糊状。久置后，粪便事的胆色素被氧化可致颜色加深。病理情况下可见如下改变：
1．粘液便：正常粪便中的少量粘液，困与粪便均匀混合不易察峥，若有肉眼可见的粘液，说明其量增多。小肠炎时增多的粘液均匀地混于粪便之中；如为大肠言不由衷奕，由于粪便已逐渐成形，粘液不易与粪便渴匀；来自直肠的粘液则附着于粪便的表面。单纯粘液便析粘液无透明、稍粘稠，脓性粘液则呈黄白色不透明，见于各类肠炎、细菌性痢疾、阿米巴痢疾、急性血吸虫病。
2．糖便：便呈粥状且内容粗糙，见于消化不良、慢性胃炎、胃窦潴留。
3．胨状便：肠易激综合征患者常于腹部绞痛后排出粘胨状、膜状或纽带状物，某些慢性菌痢疾病人也可排出类似的粪便。
4．脓性及脓血便：说明肠道下段有病变。常见于痢疾、溃疡性结肠炎、局限性肠炎、结肠或直肠癌。脓或血多少取决心书于炎症的类型，及其程度，在阿米痢产百，以血为主，血中带脓，呈暗红色稀果酱样，此时要注意与食入大量咖啡，巧克力后的酱色粪便相鉴别。细菌性痢疾则以粘液及脓为主，脓中带血。
5．鲜血便：直肠息肉、结肠癌、肛裂及痔疮等均都可见鲜红色血便。痔疮时常在排便之后有鲜血滴落，而其它疾病多见鲜血附着于粪便的表南。过多地食用西瓜、蕃茄、红辣椒等红色食品，粪便亦可呈经戈尔巴乔夫，但很易与以上鲜血便鉴别。
6．柏油样黑便：上消化道出血时，红细胞被胃肠液消化破坏，释放血红蛋白并进一步降解为血红素、卟啉和铁等产物，在肠道细菌的作用下铁与肠内产生的硫化物结合成硫化铁，并刺激小肠分泌过多的粘液。上消化道出血50-75ml时，可出现柏油样但，粪便呈褐色或黑色，质软，富有光泽，宛如柏油。如见柏油样便，且持续2-3天，说明出血量至少为500ml。当上消化道持续大出血时，排便次数可增多，而且稀薄，因而血量多，血红素不能完全与硫化物结合，加之血液在肠腔内推进快，粪便可由柏油样转为暗红色。服用活性炭、饿、铁剂等之后也可排黑色便，但无光泽且隐血试验阴性。
7．稀糊状或稀汁样便：常因肠蠕动亢进或分泌物增多所致见于各种感染或非感染性腹泻，尤其是急性胃肠炎。小儿肠炎时肠蠕动加速，粪便很快通过肠道，以致胆绿素来不及转变为粪便胆素而呈绿色稀糊样便。遇大量黄绿色的稀汁样便并含有膜状物时应考虑到伪膜性肠炎；艾滋病伴有发肠道隐孢子虫感染时也可排也大量稀汁样便。副溶血性弧菌食物中毒可峥洗肉水样便，出血性小肠炎可见红豆汤样便。
8．米泔样便：呈折色淘米水样，内含粘液片块，量大，见于重症霍乱，副霍乱患者。
9．白陶土样便：由于各种原因引起的胆管梗阻，进入肠内的胆汁减少或缺少如，以致粪便胆素生成相应的减少甚至无粪便胆素产生，使粪便呈灰白色，主要见于阴寒性黄疸。笔钡餐造影术后可因排出使粪便呈黄白色。
10．干结梗：常由于习惯性便秘，粪便在结肠内停留过久，水份过度吸收而排出羊粪便样的硬球或粪便球积成的硬条状粪便。于老年排便无力时多见。
11．细条状便：排便形状改变，排出细条或扁片状粪便，说明直肠狭窄，常提示有直肠肿物存在。
12．乳凝块：婴儿粪便中见有黄白色乳凝块，亦可能见蛋花样便，提示脂肪或酪蛋白消化不完全，常见于消化不良，婴儿腹泻。
（三）气味
正常粪便有臭味，主要因细菌作用的产物如吲哚、粪臭素、硫醇、硫化氢等引起的。，
肉食者臭味重，素食者臭味轻，粪便恶臭且呈碱性反应时，乃因未消化的蛋白质发生腐败所致患者患慢性肠炎、胰腺疾病、消化道大出血，结肠或直肠癌溃烂时，粪便亦有腐败恶臭味。阿米巴性肠炎粪便呈鱼腥臭味，如脂肪及糖类消化或吸收不良时，由于脂肪酸分解及糖的发酵而使粪便呈酸臭味。
（四）酸碱反应
正常人的粪便为中性、弱酸性或弱碱性。食肉多者呈碱性，高度腐败时为强碱性，食糖类及脂肪多时呈酸性，异常发酵时为强酸性。细菌性痢疾、血只吸虫病粪便常呈碱性；阿米巴痢疾粪便常呈酸性。
（五）寄生虫
蛔虫、晓虫、带绦虫等较大虫体或其片段肉眼即可分辨，钩虫虫体须将粪便冲冼过筛方可看到。服驱虫剂后应查找有无虫体，驱带绦虫后应仔细寻找其头节。
（六）结石
粪便中可见到胆石、胰石、粪石等，最重要且最多见的是胆石。常见于应用排石药物或碎石术之后，较大者肉眼可见到，较小者需用铜筛淘洗粪便后仔细查找才能见到。

（一）隐血试验
隐血是指消化道出血量很少，肉眼不见血色，而且少量红细胞又被消化分解发致显微镜下也无从发现的出血状况而言。
[方法学评价] 隐血试验（occultblood test,OBT）目前主要采用化学法。如邻联甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、匹拉米洞法,无色孔雀绿法、愈创木酯法等。其实验设计原理基本于血红蛋白中的含铁血红素部分有催化过氧化物分解的作用，能催化试剂中的过氧化氢，分解释放新生态氧，氧化上述色原物质而呈色。呈色的深浅反映了血红蛋白多少，亦即出血量的大小。经上试验方法虽然原理相同，但在实际应用中却由于粪便的成分判别很大，各实验室具体操作细节如粪便取材多少，试剂配方、观察时间等不同，而使结果存在较在差异。多数方献应用稀释度的血红蛋白液对这些方法灵敏度的研究表明，邻苯甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法最灵敏，可检测出0.2-1mg/L的血红蛋白，只要消化道有1-5ml的出血就可检出。还原酚酞法由于试剂极不稳定，放置可自发氧化变红而被摒弃。高度灵敏的邻联甲苯胺法常容易出现假阳性结果，中度灵敏的试验包括联苯胺法、无色孔雀绿法，可检出1-5mg/L的血红蛋白，消化道有5-10ml出血即为阳性。联苯胺法由于有致癌作用而无色孔雀绿法在未加入异喹啉时灵敏度差，需（20mg/L血红蛋白，）试剂配制和来源均不如拉米洞方法方便。愈创木酯法灵敏度关，需6-10ml/L血红蛋白才能检出，此时消化道出血可达20ml但假阳性很少，如此法为阳性，基本可确诊消化道出血。目前国内外生产应用四甲基础联苯胺和愈创木酯为显色基质的隐血试带，使隐血试验更为方便，但未要么本解决隐血试验方法的学中的问题。
以上各种隐血试验化学法虽简单易行，但均基于血红蛋白中的血红素可促使又氧水分解释放新生态氧，使色原物质氧化这一原理，方法上缺乏特异准确性。此外化学试剂不稳定，久置后可使反应减弱。外源性动物仪器如含有血红蛋白，肌红蛋白、其血红素的作用均可使试验呈阳性，大量生食蔬菜中含有活性的植物过氧化物酶也可催化双氧水分解，出现假阳性反应，所以除愈创木酯法外均要求素食3天，为此有人提出将粪便用水作1：3稀释加热煮沸再加冰乙酸和乙醚提取血红蛋白测定可排除干扰。此法虽然可靠，但不适用于常规工作。加外血液如在肠道停留过久，血红蛋白被细菌降解，血红素不复存在，则会出现与病情不符的阴性结果，病人服用大量维生素C划其它具有还原作用的药物，以实验中可使过氧化物还原，不能再氧化色原物质，亦可使隐血试验呈假阴性。除上桩干扰隐血试验亦可由于检验人员取材部位不同，标本反应时间不同，检验员对显色判断不同，故在不同一方法的试验中，还可产生误差等，致使目前国内外尚无统一公认的推荐的方法，更谈不到实验的标准化。
为解决隐血试验的特异性问题及鉴别消化道出血部位，当前发展的最快的是免疫学方法，如免疫单扩法、对泫免疫电泳、酶联免疫吸附试验、免疫斑点法、胶乳免疫化学凝聚沦，放射免疫扩散法、反向间接血凝法、胶体金标记夹心免疫检验法等，此类试验所用抗体分为两大类，一种为抗人血红蛋白抗体，加一种抗人红细胞基质抗体。免疫学方法具有很好的灵敏度，一般血红蛋白为0.2mg/L,0.03mg/g粪便就可得到阳性结果，且有很高的特异性，各种动物血血红蛋白在500mg/L辣根过氧化物酶在2000mg/L时不会出现干扰，因而不需控制饮食，据Herzog和Cameron等研究，正常人24小时胃肠道生理性失血量为0.6ml，若每日在于2ml，则属于病理性出血。由于免疫学方法的高度敏感性，又由于有正常的生理性失血，如此高的灵敏度，要在某些正常人特别是服用刺激备用肠道药物后可造成假阳性。但免疫学支隐血试验主要检测下消化道的优点，目前被认为是对大肠癌普查最适用的试验，免疫学法隐血试验主要检测下消化道出血，约有40-50%的上消化道出血不能检出。原因是：①血红蛋白或红细胞经过消化酶降解就业性或消化殆尽已不具有原来免疫原性；②过量大出血而致反应体系中抗原过剩出现前带现象；③病人血红蛋白的抗原与单克隆抗体不配，因此有时外观为柏油样便而免疫法检查却呈阴性或弱阳性，此进需将原已稀释的粪便再稀释50-100倍重做或用化学法复，检。近年来某些实验室还采用卟啉荧光法血红蛋白定量试验，用絷草酸试剂使血红素变为卟啉进行荧光检测，这样除可测粪澡未降解的血红蛋白外，还可测血红素衍化物卟啉，从而克服了化学法和免疫法受血红蛋白降解影响缺点，可对上、下消化道出血同样敏感，但外源性血红素、卟啉类物质具有干扰性，且方法较复杂，故不易推广使用。此外免疫学的方法也从检测血红蛋白与人红细胞基质扩展到测定粪便中其它随出血而出现的带有良好的抗原性而又不易迅速降的蛋白质、如白蛋白、转铁蛋白等，灵敏度达2mg/L。
[临床意义] 粪便隐血检查对消化道出血的诊断有重要价值。消化性溃疡、药物致胃粘膜损伤（如服用消炎痛、糖皮质激素等）、肠结核、克罗恩病、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病及胃癌、结肠癌等消化肿瘤时，粪便隐知试验均常为阳性，故须结合临床其它资料进行鉴别诊断在消化性溃疡时，阳性率为40-70%，呈间断性阳性。消化性溃疡治疗后当粪便外观正常时，隐血试验阳性仍可持续5-7天，此后如出血完全停止，隐血试验即可转阴。消化道癌症时，阳性率可达95%。呈持续性阳性，故粪便隐血试验常作为消化道恶性肿瘤诊断的一个筛选指标。尤其对中老年人早期发现消化道恶性肿瘤有重要价值。此外在流行性出血热患者的粪便中隐血试验也有84%的阳性率，可作为该病的重要的佐证。
（二）粪胆色素检查
正常粪便中无胆红素而有粪胆原及粪胆素。粪胆色素检查包括胆红素、粪胆原、粪便胆素检查。
1．粪胆红素检查婴儿因正常肠道菌群尚未建立或成人因腹泻待肠蠕动加速，使胆红素来不及被肠道菌还原子核时，粪便可呈金黄色或深黄色，胆红素定性试验为阳性，如部分被氧化成胆绿素由粪便呈典绿包。为快速检测粪便中的胆红素可用Harrison法，如呈绿蓝色为阳性。
2．粪胆原定性或定量：粪便中的粪胆原在溶血性黄疸时，由于大量胆红素排入肠道被细菌还原而明显增加；梗阻性黄疸时由于排向肠道的胆汁沽少而粪便胆原明显减少；肝细胞性黄疸时粪胆原则可增加也可减少，视肝内梗阻情况而定。粪便胆原定性或定量对于黄疸类型的鉴别具有一定价值。无论定性或定量均采用Ehrlich方法，瓜后生成红色化合物，呈深浅与粪胆原量成政权比，正常人每100克粪便中胆原量为75-350mg。低于或高于参考值可助诊为梗阻性或溶血性黄疸。
3．粪胆素检查：粪便胆素是由粪便胆原在肠道中停留被进上步氧化而成，粪便由于粪胆素的存在而呈棕黄色，当涡胆管结石、肿瘤而致完全阻塞时，粪便中因无胆色素而呈白陶土色。可用Schmidt氯化高汞试剂联合检测胆红素及粪便胆素，如粪便悬液呈砖红色表示粪胆素阳性，如显绿色则表示有胆红素被氧化为胆绿素，如不变色，表示无胆汁入肠道。
（三）消化吸收功能试验
消化吸收功能试验是一组用以检查消化道功能状态的试验。近年来由于采用了各种放射性核素技术机而取得了很大进展，这组试验包括脂肪消化吸收试验，蛋白质消化吸收试验和糖类消化吸收试验等，但操作技术复杂，不便常规使用。因此更在强调在粪便一般镜检中观察脂肪小滴、肌肉纤维待，以此作为胰腺功能不全的一种筛选指标。
此外还可做脂肪定量测定，即在普通膳食情况下，政党优人每24小时粪便中的总脂擀理约显2-5克（以测定的总脂肪酸计量）或为干粪便的 7。3-27。6%.粪便脂质主要来源是食物，小部分系来源于胃肠道分泌，细胞脱落和细菌的代谢的产物。在病情况下，由于脂肪的消化或吸收能力减退，粪便中的总脂量可以大为增加，若24小时粪便中总脂量超过6克时，称为脂肪泻。慢性胰腺炎，胰腺癌，胰腺纤维囊性变等胰腺疾病，梗阻性黄疸，胆汁分泌不足的肝胆疾病，小肠病变如乳糜Whipple病，蛋白丧失性肠病时均可引起脂肪泻。
脂肪定量可协助诊断以上疾病。常用的方法有称量法和滴定清法。称量法是将粪便标本经盐酸处理后，使结合脂肪酸变为游离的脂肪酸，再用忆醚萃取中性脂肪及游离脂肪酸，经蒸发除去乙醚后在分析天平上精确称其重量。滴定法也称Vande kamer法，其原量是将粪便中脂肪与氢氧化钾溶液一起煮沸皂化，冷却后加入过量的盐酸使脂皂变为脂酸，再以石英钟油醚提取脂酸，取一份提取液蒸干，其残渣以中性乙醇溶解，以氢氧化钠滴定，计算总脂肪酸含量。
利用脂肪定量也可计算脂肪吸收率，以估计消化吸收功能。具体做省法是在测定前2-3天给予脂肪含量为100克的标准膳食，自测定日起，仍继续给予标准膳食连续3天，每日收集24小晨粪便做总脂测定。
脂肪吸收率（%）=膳食总脂量-粪便总脂量/膳食总脂量×100%
正常人每天摄入脂肪100克，其吸收率在95%以上，脂肪泻量明显减低。
目前检测有无胰蛋白缺乏的试验有X线胶消化法。由于该法准确度和精密性都很差，而很少应用。

粪便直接涂片显微镜检查是临床常规检验项目。可以从中发现病理成分，如各种细胞、寄生虫卵、真菌、细菌、原虫等，并可通过观察各种食物残渣以了解消化吸收功能。为此，必须熟悉这些成分的形态。 一般采用生理盐水涂片法，以竹签取含粘液脓血的部分，若为成形便则常自粪便表南，深处胩粪便端多处取材，混悬于载有一滴生理盐水的载玻片上，涂成薄片，厚度以能透视纸上字迹为度，加盖玻片，先用低倍镜观察全片有无虫卵、原虫疱囊、寄生虫幼虫及血细胞等，再用高倍镜详细检查病理成分的形态及结构。（图10-1） linchuangjichujianyanxue059.jpg粪便的显微镜所见 图10-1 粪便的显微镜所见 （一）细胞 1．白细胞正常粪便中不见或偶见，多在带粘液的标本中见到，主要是中性分叶核粒细胞。肠炎进一般少于15个/HPF，分散存在。具体数量多少与炎症轻重及部位有关。小肠淡症时白细胞数量不多，均匀混于粪便内，且因细胞部分被消化而不易辨认。结肠炎症如细菌性痢疾时，可见在量白细胞或成堆出现的脓细胞，亦可见到吞有异物不小吞噬细胞。在肠易激综合征、肠道寄生虫病（尤其是钩虫病胶阿米巴痢疾）时，粪便涂片洌还可见较多的嗜酸性粒细胞，可伴有夏拉莱登结晶。 2．红细胞正常粪便中无红细胞。肠道下段炎症或出血量可出现，如果痢疾、溃疡性结肠炎、结肠癌、直肠息肉、急性吸虫病等。粪便中新鲜红细胞为草黄色、稍有折光性的圆盘状。细菌性痢疾理红细胞少于白细胞，多分散存在且形态正常；阿米巴痢疾者红细胞多于白细胞，多成堆存在并有残碎现象。 3．巨噬细胞（大吞噬细胞）为一种吞噬较大异物的单核细胞，在细菌性痢疾和直肠炎症时均可见到。其胞体较中性粒细胞为大，或为其3倍或更大，呈圆形、卵圆形或不规则形，胞核1-2个岩石小不等，常偏于一侧。无伪足伸出者，内外质只是限不清。常含有吞噬的颗粒及细胞碎屑，有量可见含有红细胞、白细胞、细菌等，此类细胞多有不同程度的退化的变性现象。若其胞质有缓慢伸缩时，应特别注意与溶组织内阿米巴滋养体区别。 4．肠粘膜上皮细胞整个小肠，大肠粘膜的上皮细胞均为柱状上皮，只有直肠齿状线处由复层立方上皮信未角化的复层鳞状上皮所被覆。生量情况下，少量脱落的柱状上皮多忆破坏，故正常粪便中见不到。结肠炎症时上皮细胞增多，呈卵圆形或短柱形状，两端钝圆，细胞较厚，结构模糊，夹杂于白细胞之间，伪膜性肠炎的肠粘膜小块中可见到成片存在的上皮细胞，其粘液胨状分泌物中亦可大量存在。 5．肿瘤细胞取乙状结肠癌、直肠癌病人的血性粪便及时涂片染色，可能见到成堆的具异形性的癌细胞。 在进行细胞镜检时，至少要观察10个高倍镜视野，然后就所见对各类细胞的多少给予描述，报告方式见表10-1。 表10-1 粪便涂片镜检时细胞成分的报告方式

10个高倍视野（HPF）中某种细胞所见情况	报告方式（某种细胞数/HPF）
10个高倍视野中只看到1个	偶见
10个高倍视野中有时不见，最多在一个视野见到2-3个	0-3
10个高倍视野中每视野最少见5个，多则10个	5-10
10个高倍视野中每视野都在10个以上	多数
10个高倍视野中细胞均匀分布满视野，难以计数	满视野

（二）食物残渣 正常粪便中的食物残渣均系已充分消化后的无定形细小颗粒，可偶见淀粉颗粒和脂肪小滴等未经充分消化的食物残渣，常见于有以下几种： 1．淀粉颗粒一般为具有同心性纹或不规则放射线纹的大小不等的圆形、椭圆形或棱角状颗粒，无色，具有一定折光性。滴加碘液后呈黑蓝色，若部分水解为结糊精者则呈棕红色，腹泻者的粪便中常易见到，在慢性胰腺炎、胰腺功能不全、碳化合物消化不良时岢在粪便中大量出现，并常伴有较多的脂肪小滴和肌肉纤维。 2．脂肪粪便中的脂肪有中性脂肪、游离脂肪酸和结合脂肪酸三种形式，中性脂肪亦即脂肪小滴，呈大小不一圆形折光强的小球状。用苏丹Ⅲ染色后呈朱红色或橘色。大量存在时，提示胰腺功能不全，因缺乏脂肪酶而使脂肪水解不全所致见于急、慢性胰腺炎，胰头癌，吸收不良综合征，小儿腹泻等。游离脂肪酸为片状、针束状结晶，加热溶化，片状者苏心丹Ⅲ染为橘黄色，而针状者染色，其增多表示脂肪吸收障碍，可见于阻塞性黄疸，肠道中缺乏胆汁时，结合脂肪酸是脂肪酸与钙、镁等结合形成不溶性物质，呈黄色不规则块状或片状，加热不溶解，不被苏丹Ⅲ染色。 正常人食物中的脂肪经胰脂肪酶消化分解后大多被吸收，粪便中很少见到。如镜检脂肪小洋>6个/高倍视野，视为脂肪排泄拉多，如大量出现称为脂肪泻常见于腹泻病人，此外食物中脂肪过多，胆汁分泌失调，胰腺功能障碍也可见到，尤其在慢性胰排出有特征性的粪便：量多，呈泡沫状，灰折色有光渗恶臭，镜检有较多的脂肪小滴。 3．肌纤维日常食用的肉类主要是动物的横纹肌，经蛋白酶消化分解后多消失。大量肉食后可见到少量肌纤维，但在一张盖片范围内（18mm×18mm）不应超过10个，为淡黄色条状，片状，带纤维的横纹，加如加入伊红可染色红色。在肠蠕支亢进、腹泻或蛋白质消化不良时可增多，当胰腺外分泌功能减退时，不但肌肉纤维增多，且其纵横纹均易见，甚至可见到细胞核，这是胰腺功能严重不全的佐证。 4．胶原纤维和弹性纤维为无色或微黄色束状边缘不清晰的线条状物，正常粪便中很少见到。有胃部疾患而缺乏胃蛋白酶时可较多出现。加入30%醋酸后，胶原纤维膨胀呈胶状而弹性纤维的丝状形态更为清晰。 5．植物细胞及植物纤维正常粪便中仅可见少量的形态多样化。植物细胞可呈圆形、长圆形、多角形、花边形等，无色或淡黄色、双层细胞壁，细胞内有多数叶绿体，须注意与虫卵鉴别。植物纤维为螺旋形或网格状结构。植物毛为细长、有强折光、一端呈尖形的管状物，中心有贯通两端的管腔。肠蠕动亢进、腹泻时此类成分增多，严重者肉眼即可观察到粪便中的若干植物纤维成分。 （三）结晶 在正常粪便，人，可见到少量磷酸盐、牙齿酸钙、碳酸钙结晶，均无病理意义。夏科-莱登结晶为无色透明的菱形结晶。两端尖长，大小不等，折光性强，常在阿米巴痢疾，钩虫病及过敏性肠炎粪便中出现，同时可见到嗜酸性粒细胞。血晶为棕黄色斜方形结晶，见于胃肠道出血后的粪便内，不溶于氢氧化钾溶液，遇硝酸呈蓝色。 （四）细菌 1．正常菌群与菌群失调粪便中细菌极多，占干重1/3，多属正常菌群。在健康婴儿粪便中主要有双歧杆菌、拟杆菌、肠杆菌、肠球菌，少量芽胞菌（如梭状菌属）、葡萄球菌等。面人粪便中以大肠埃希菌，厌氧菌和肠球菌为主要菌群，约占80%；产生杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌等多为过路菌，不超过10%。此外尚可有少量芽胞菌和酵母菌。正常人粪便中菌量和菌谱处于相对稳定状态，保持着细菌与宿主间的生态平衡。若正常菌群突然消化或比例失调，临床上称为肠道菌群调症。其确证方法需通过培养及有关细菌学鉴定。但亦可作粪便涂片，行革兰氏染色后油浸镜观察以初步判断。正常粪便中球菌和杆菌的比例大致为1：10。长期使用广谱抗生素，免疫抑制剂及慢性消耗性疾病患者，粪便中球/杆菌经值变大。若比值显著增大，革兰氏阴性杆菌严重沽少，甚至消失，而葡萄球菌或真菌等明显增多，常提示有肠道菌群紊乱或发生二重感染，此种类型菌群失讯症称伪膜性肠炎，此时粪便多呈稀汁样，量很大，涂片革兰氏染色常见培养证明为金黄色溶血性葡萄球菌，其次为假丝酵母菌。由厌氧性难辨芽胞梭引起的伪膜性肠炎近年来日渐增多，应予以重视。 2．霍乱弧菌初筛霍乱弧菌肠毒素具有极强的致病力。作用于小肠粘膜引起的液大量分泌，导致严重水电解质平衡紊乱而死亡。用粪便悬滴检查和涂片染色有助于初筛此菌。取米泔样粪便生理盐水悬滴检查可见呈鱼群穿梭样运动活泼的弧菌，改用霍乱弧菌抗血清悬滴检查，即做制动试验时呈阳性反应弧菌不再运动。粪便粘液部分涂片革兰氏染色及稀释石碳酸复红染色后，油浸镜观察若见到革兰氏阴性红色鱼群样排列，呈现逗点状或香蕉样形态的弧菌，则需及时报告和进行培养与鉴定。 （五）肠道真菌 1．普通酵母菌是一种环境中常见的真菌，可随环境污染而进入肠道，也可见于服用酵素养片后，胞体小，常呈椭圆形，两端略尖，微有折光性，不，见其核，于繁其可见侧芽，常见于夏季已发酵的粪便中。其形态有时与微小内蜒阿米巴包囊或红细胞相混合但加入稀醋酯后不消失，而红细胞则被溶解。在菌群失调症患者，尚需与白色假丝酵素养相区别，后者须见到假菌丝与厚膜孢子方可诊断否则只能报告酵素养样菌。 2．人体酵母菌为一种寄生于人体中的真菌,亦称人体酿母菌。呈圆形或卵圆形，直径5-15μm，大小不一。内含一个大而透明的圆形体，称为液泡。此菌细稚期液泡很小，分散于胞质之中，成熟时液泡聚合成一个大球体，占细胞的大部分。在液泡周围的狭小的胞质带，内有数颗反光性强的小点。此菌有时易与原虫包囊，特别有人芽囊原虫和白细胞相混淆，可用蒸馏水代替生理盐水进行涂片，此时人体酵母菌迅速破坏消失而原虫包囊及白细胞则不被破坏。亦可用碘染色，液泡部分不着色，胞质内可见1-2核，此菌一般无临床意义。大量出现时可致轻微腹泻。 3．假丝酵母菌：过去也译作念珠菌（candida）。正常粪便中极少见，如见到首先应排除由容器污染或粪便在室温放置过久引起的污染，病理粪便中出现的假丝酵母菌以白色假丝母菌最为多见，常见于长期使用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂和放、化疗之后。粪便中可见卵圆形，薄壁、折光性强，可生芽的酵母样菌，革兰氏染色阳性，可见分支状假菌丝和厚壁孢子。 （六）寄生虫卵 从粪便中检查寄生虫卵，是诊断肠道寄生虫感染的最常用的化验指标。粪便中常，见的寄生虫的卵有蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵、晓虫卵、华枝睾吸虫卵、血吸虫卵、姜片虫卵、带绦虫卵等（见图10-2）。详见《寄生虫学和寄生虫学检验》。寄生虫卵的检验一般用生理盐水涂片法，除华支睾只虫需用高倍镜辨认外，其它均可经低倍镜检出。在识别寄生虫卵时应注意虫卵大小、色泽、形态，卵壳的厚薄、内部结构特点，认真观察予以鉴别，观察10个低倍视野，以低倍镜所见虫卵的最低数和最高数报告。为了提高寄生虫卵的检出阳性率，还可采用离心沉淀法，静置沉淀集卵法，通过去除粪渣，洗涤沉淀后涂片镜检，此种集卵法适用于检出各种虫卵，也可采用饮和盐水浮聚法，此法适用于检查钩虫卵、蛔虫卵及鞭虫卵。 （七）肠寄生原虫 肠寄生原虫包括阿米原虫、隐孢子虫、酚毛虫、纤维毛虫和人芽囊原虫。它们的形态学检查和鉴别要点详见《寄生虫学和寄生虫学检验》。 1．肠道阿米巴：包括溶组织内阿米巴、脆弱双核阿米巴和结拨内阿米巴等。检查阿米巴时可直接用生理盐水涂片查滋养体，用碘染色法查包囊。溶组织内阿阿性痢疾病人粪便中可见大滋养体；带虫者和慢性间歇型阿米巴痢疾粪便中常见小滋养体、包囊前期及包囊，应注意与结肠内阿米巴鉴别。脆弱双核米巴通常寄生在人体结肠粘膜腺窝里，只有滋养体，尚未发现包囊，具有一定的致病力，可引起腹泻，易与白细胞混淆，应注意鉴别。结肠内阿米巴寄生在大肠腔骨，为无致病性共生阿米巴，对人感染较低溶组织阿米巴普通，无论滋养或包囊均需与后者区分。 2．隐孢子虫（Cryptosporidium）属肠道完全桊生性原虫。主要寄生于小肠上马细胞的微绒毛中。目前至少存在着大型种和小型种两种不同形态瓣种别，在人体和多种动物体内寄生的均属小型种，即微小隐孢子虫。自1982年获得性免疫缺陷综合征的重要手病原，已列为艾滋病重要检测项目之一。人体感染隐孢子虫手其临床表现因机体免疫状况而异在免疫功能健全的人主要为胃肠炎症状，呕吐、腹痛、腹泻、病程1-2周可自愈；在免疫功能缺陷或AIDs 病人则有发热、嗳气、呕吐，持续性腹泻，排稀汁样大便，每日多达70多次，排水量每日达12-17升，导致严重脱水，电解质紊乱和营养不良而死亡。隐孢子虫病的诊断主要靠从粪便中查出该虫卵囊。由于卵囊直径仅为4.5-5.5μm，且透明反光，不易识别，需用比密1.20蔗糖水浓集法加经集中后于600倍放大条件下始可看到，换用1000-1500倍放大，易于看到内部结构（有4个弯曲密迭的子孢子及一个圆形的球状残体。）吉姆萨染色卵囊呈淡蓝色，伴有红色颗粒状内含物。用相差显微镜观察时效果更佳。 3．鞭毛虫和纤毛虫 ：人体常见的鞭毛虫及纤毛虫有蓝氏贾第董事会毛虫、迈唇董事会毛虫、人肠毛滴虫、肠内滴虫、中华内滴虫和结肠小袋纤毛虫等。蓝氏贾第董事会毛虫寄生在小肠内（主要在十二指肠），可引起的慢性腹泻。如寄生在胆囊，可致胆囊炎。结肠小袋纤毛虫寄生于结肠内，多呈无症状带虫状态。当滋养体浸入肠壁可引起阿米巴样痢疾。人肠毛滴虫一般认为列致病性，迈氏唇鞭毛虫及中华肠内滴虫较少见，一般不致病，除人肠毛滴虫仅见到滋养外，其它董事会毛虫、纤毛虫都可见到滋养体与包囊。要粪便直接涂片观察时要注意它们的活动情况，并以鞭毛、波动膜、口隙、细胞核等作为鉴别的依据，必在时可在涂片尚未完全干燥时用瑞特染色或碘液、铁苏木精染色进行态诚学鉴别。 4．人芽囊帮原虫（Blastocystishominis）于1912年由Brumpt首先命名，其后分类位置一直很乱。1967年以前曾被误认为酵母菌、董事会毛虫的包囊等。目前认为人芽囊原虫是寄生在高等灵长类动物和人体消化道内的原虫。可引起腹泻。其形态多样，有空泡型、颗粒型、阿米巴型和复分裂型虫体，只有阿米巴型为致病性虫体。

精液主要由精浆组成。睾丸曲细精管内的生精细胞在垂体前叶促性腺激素的作用下，经精原细胞、初级精母细胞及精子细胞几个阶段的分化演变，最后发育为成熟的精子，此过程约需70天，70%的精子贮存于附睾内，2%于输精管内，其余储契于输精管的壶腹腔部，精囊仅存少量。射精时，精子随精浆一起经输精管、射精管和尿道排出体外。精浆由精囊液、前列腺液以及睾丸、附睾、输精管、尿道旁腺、尿道球腺分泌的少量液体混合而成。 清液中水约占90%，固体成分约占10%，有形成分除精子外，尚含少量白细胞和生殖道脱落的上皮细胞等。精浆的化学成分十分复杂，除前面提到的成分外，还有各种精浆蛋白（白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白原、α2巨球蛋白、纤维蛋白等，总浓度为55/75g/L）、酶类（酸性磷酸酯酶、乳酸脱氢酶-X、溶菌酶等）、激素、微量金属无素等。 精液检查包括精子的形态、当选量和功能；以及精浆的生物百分比学、免疫学、微生物学及精子功能等。 精液检查的主要的目的有：①评价男性生育功能，为不育症的诊断和疗效观察提供了依据；②辅助男性生殖系统疾病的的诊断；③输精管结扎术后的疗效观察；④计划生育和科研；⑤为人工授精和精子库的筛选优质精子；⑥法医学鉴定。 一、标本采集 1．准备工作①向受检者解精液检查的意义，标本采集方法和注意事项。②标本采集室最好在实验室附近，室温应控制在20-35摄氏度。室内必须清洁、肃静、无人为干扰；③采集标本前禁欲3-7天。④采集精液前排净尿液。 2．采集方法：可用手淫法或其它方法。将一次射出和全部精液直接排入洁净、干燥的容器内（为能用乳胶避孕套）。开始射出的精液精子浓度最高。终末部分精子浓度最低。采集微生物培养标本须无菌操作。 3．标本运送：精液采集后应立即送检。温度低于20摄氏度或高于40摄氏度将影响精子活动故冬季应注意保温，可将标本瓶装入内衣袋贴身运送。 4．标本采集次数：因精子生成日间变动较大，不能仅凭一次检查结果做诊断。一般应间隔1-2周检查一次。连续检查2-3次。 二、一般性状检查 （一）量 精液完全液化后测定其排出量。有生育力的正常男性一次射精最为2-6毫升，平均3.5ml。一次射精量与射精频度呈负相关。若禁欲5-7天射精量仍少于2毫升，视为精液减少；若不射精，称为无精液症（aspermia）。精浆是精子活动的介质，并可中和阴道的酸性分泌物，以免影响精子活力。精液量减少（精浆不足）不利于精通过阴道进入子宫和输狼管，影响受精。若一次射精量超过8毫升，精子被稀释，也不利于生育。此可因垂体前叶促性腺素的分泌功能亢进，使雄激素的水平升高所致亦可见于禁欲时间过长者。 （二）外观 1．颜色和透明度：正常精液呈灰白色，自行液化后为半透明的乳白色，久未射精者可略显浅黄色。凡精液呈鲜红、淡红、暗红或酱油色并含有大量红细胞者称为血精，可能由于前列腺和精非特异性炎症、生殖系结核、肿瘤或结石所致黄色或棕色脓性精液见于前列腺炎和精囊炎。 2．粘稠度：正常情况下新排出的精液迅速凝成胶胨状，然后逐渐变化。若新排出的精液呈米汤样，可能为先天性精囊或精囊液流出管道阻塞所致精液稀薄，粘稠度下降，也要见于精子浓度太低或无精子症时。 （三）气味 正常精液具有栗花和石楠花的特殊气味，由于前列腺液产生。 （四）液化时间 精液液化时间是指新排出的精液人胶胨转变为自由流动状态所需的时间。有关精液凝固与液化的过程极其复杂，有相当多的物质参与，例如前列腺与精囊分泌物等都可能影响其时间长短，此外也受温度影响。在室温下，正常精液排出后60分钟内液化。前裂腺炎时，由于其功能影响，导致液化时间延长，甚至不液化，不液化可抑制精子活动力，而影响生育能力。 三、化学检查 精浆中的一些生化标志物可反映副性腺性功能。例如柠檬酸、锌、谷氨酰胺转酞酶和酸性磷酸酶反映前列腺功能；果糖和前列腺素反映精囊功能；游离左旋肉毒碱、甘油磷酸胆碱和α葡萄苷酶反映附睾功能。这些特异性标志物总排出量降低反映分泌功能低下，可用以评价男性副性腺的分泌功能。 （一）PH 精液PH测定应在射精后1小时内完成，放置时间延长，PH下降。正常精液PH为7.2-8.0。如PH<7并伴少精症，可能是由于输精管、精囊或附睾发育不全。 弱碱性的精液射入阴道后可中和阴道分泌物中的有机酸，利于精子游动。当PH<7或>8时均影响精子活动。 （二）果糖 精浆中的果糖来自精囊液，由精囊所分泌。它是精子活动的能源。精子轴丝收缩依赖STP供给能量，而ATP可由果糖分解产代谢产生，故精浆果糖浓度减低将使精子活动力减弱，影响受精率。在先天性精囊缺如时无果糖，精囊疾病如精囊炎时果糖下降。 [参考值] ≥13μmol/一次射精 （三）酶类 1．酸性磷酸酶（acid phosphatase,ACP）精浆中的酸性磷酸酶几乎全部来自前列腺，属前列腺酸性磷酸酶。因此测定精浆中ACP有助于了解前裂腺功能和对前列腺疾病的诊断。前列腺炎时PAP活性减低；前列腺癌和前列腺肥大时，PAP活性可增高。PAP有促进精子活动的作用。精浆中PAP减低，精子活动减弱，可使受精率下降。 [参考值] >200U/一次射精（β-硝基酚法） 2．乳酸脱氢酶-X（LD-X）精液中有6种乳酸脱氢酶同工酶，其中LD-X活性最强，约相当于LD总活性的1/3。LD-X在是存在于精母细胞、精子细胞和精子线粒体中特异酶，具有组织特异性，对精子生成、代谢、获能、活动能力和受精过程均有重要作用。 LD-X测定常用电泳法， 但较繁琐。1988年国内建立了直接比色法，方法方便，易于普及。 [参考值]LD-X/LD>40% [临床意义] LD-x 活性和相对活性与精子浓度特别是活精子浓度呈良好的正相关，活性减低可致生育力下降。LD-X活性可作为评价男性生育功能的指标。睾丸萎缩患者，LD-X活性降低或消失。长期服用棉酚可致精子生成障碍，甚至无精子生成，精液LD-X活性也降低或甚至消失。这说明 LD-X活性与睾丸生精功能有关，是病人睾丸生精功能的良好指标。 3．精子顶体酶（acrosin）存在于精子项体内，是一种蛋白水解酶，在受精过程中起重要作用，可用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯-醇脱氢酶（N-benzoy –L-arginine sthyl esteralcohol dehydrogenase，BAEE-ADH）法测定。 [参考值 ] BAWW-ADH法（X±s）36.72±21.43U/L [临床意义]在项体反应中项体酶和其它的水解酶一起释放，使卵细胞透明带水解，钏使精子进入卵细胞，完成受精过程，项体酶还能促进生殖系统中的激肽释放，增强精子活力，促进精子运动，有利于受精。精子项体酶活性减低将致生育力下降。据报道不育组项体酶活性显著低于生育组。因此可将精子项体酶活性作为病人精子受精能力和诊断男性不育症的参考指标。 （四）精浆锌 精浆中含多种微量元素，其中以对锌的研究较多，精浆锌比血义锌浓度高，能促进生殖器官发育，维持正常生精功能，提高精子浓度和活力。精浆锌减低可致生殖器官发育不良、精子生成减少、死精症等。严重缺陷锌可致不育症。精浆锌测定可作为评价男性生育功能和诊治不育症的参考指标之一。 [参考值]Zn(X±s)2.4μmol/一次射精 四、显微镜检查 （一）涂片检查 精液化后充分混匀制成压滴片，筛检有无精子及精子能否运动。若未查到精子，尚须制备浓缩标本离心法复检。如仍查不到精子，则可判定为无精子症；若仅见少量精子，则称为精子缺乏；若查到的精子全部不运动，则可能为死精子症，但须经体外活体染色检查方能确定。 涂片检查也是检查输精管结扎效果的常规方法。一般于术后经5-6次射精，原贮于附睾和精囊内的精子已排净。通常于术后第六周开始检查。每周1-2次。若连续三次查不到精子则可认为手术成功。否则说明手术失败。 （二）精子活动力和存活率 1．活动力：精子活动力（spermmotility）是指精子向前运动的能力。WHO将其分为四级：a级：精呈前向运动；b级：慢或呆滞的前向运动；c级：非向前运动；d级：不动。 精子活动力受温度和保存时间的影响。精液射出后于37摄氏度条件下放置8小时，全部精子将失动活动力。因此必须使用液化后的新鲜标本检查。 活动力正常值：射精后60分钟内，精子50%或更多具有前向运动，25%或更多具有快速前向运动。精子活动力减弱或死精子过多是导致不育的主要原因。 2．精子存活率以“活”粗子比率表示，若不活动的精子较多，应时持体外活体染色检查，以鉴别其死活。活精子的细胞膜能阻止伊红Y、台盼蓝等染色剂进入细胞内，故不被染色；死精子细胞膜完整性受损。失去屏障功能，可被染色成橘红或蓝色。有生育力男性伊红染色法的活精子率≥75%。 [临床意义]精子活动力与受精的关系十分密切。精子活动力低下，难以抵达输卵管或无力与卵子结合而不能完成受精过程。A绵活动力的精子量不足也会影响受精率。若连续检查，精子存活率不足40%，且以c级活动力精子为主，则可能成为男性不育的原因之一。精子活动力下降，见于：①精索静脉曲张，由于静脉血回泫不畅，导致阴囊内温度升高及睾丸组织缺氧，使精子活动力下降；②生殖系非特异性感染以及使用某些抗代谢药、抗疟药、雌激素、氧化氮芥等时。 （三）精子数量 通过精子计数可求得精子浓度，乘以精液量还可求得一次射精排出的精子总数。正常成年男性，精子数量个体间的差异较大，精子浓度为（50-100）×109/L。＜20×109/L为少精子症；正常人一次射精排精子总数为≥40×106。精子数量减低可见于：①精索静脉曲张；②有害金属和放射性损害；③先天性和后天性睾丸疾病（如睾丸畸形、萎缩、结核、淋病、炎症等）；④输精管、精囊缺陷；⑤老年人在50岁以上者精子生成减少。 （四）精子形态（见图11-1） 通常用于精子形态学检查的方法的有两种，一种是制成新鲜湿处副县长相差显微镜观察；加一种是将精子固定、染色后用亮视野光学显微镜观察。两处方法检查的精子形态无明显差别，染色后精子头可能稍有缩小。 1．正常精子形态检测政党精子形态的应遵循严格标准：①正常精子头部呈椭圆形，其正常标准为头部长度为4.0-5.5μm，宽为2.5-3.0μm，长与宽的比值为1.5-1.75项体区占头部的40-70%；②必须不存在颈、中段或尾部的缺陷；③细胞质微粒不大于正常头部的1/3；④将所的处于边沿异常状态的清子均列为不正常。 2．有缺陷精子：用这种形态学分析方法考虑的精子细胞功能部位，因此认为没有必要常规的去区分所有头部大小和形态之间可划或尾部缺陷之间的变异如果大多数精子细胞中出现某一种部位的异常，则应对这一普通的缺陷给予注释。需记录的缺陷有： （1）头部形状、大小缺陷：包括大头、小头、锥形头、梨头、无定形头、空泡样头（头部大于20%区域出现不着色的空泡区、）双头或以上缺陷的联合体。 （2）颈、中段缺陷：包括缺尾可见到游离或脱落的头部，未附着或弯曲尾尾与头部长轴结呈90度角，肿胀、不规则、弯曲的中段，异常薄的中段无线粒体鞘或以上任何类型缺陷的联合体。 （3）尾部异常：包括短尾、多尾、发夹状尾、断尾、宽度不规则或卷尾、或尾部伴有末端微滴，或以上任何类型缺陷的联合体。 （4）细胞质微粒：大于正常头部的面积的1/3。细胞质微粒一般位于颈可中段部分，也有未成熟精子微粒沿尾部分而布在不同部位。 许多形态学的异常的精子有多种缺陷。当多种缺陷同时存在时，只记录一种，但应优先记录头部缺陷，其次为中段缺陷，最后为尾部缺陷。每种精子缺陷的平均数目称为畸形精子指数，是预测精子在体内、体外功能有意义的指标，因此形态学分析应该是多参数原，应分别记录每种缺陷。异常形态见图11-1。 linchuangjichujianyanxue060.jpg精子形态 图11-1 精子形态 [临床意义] 正常精液中正常形态的精子应≥30%，精液中正常形态的精子减少称畸形精子症，与睾丸、附睾的功能异常密切相关。可见于生殖系感染。精南疆静脉曲张、雄性激素水平异常时；某些化学药物（如硝基唪喃妥英）、遗传因素也可影响睾丸生精功能，导致畸形精子增多。 （五）未成熟的生殖细胞（见图11-2） 未成熟的男性生殖细胞即生精细胞，包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母的细胞和以育不完全的精子细胞。这神经过敏细胞胞体较大，常有1-2个核，有时易与中性粒细胞相混淆，尤其是用未染色精液镜检时不易识别，需在时可用过氧化物酶染色鉴别，前者为阴性，后者为阳性，正常人未成熟精细胞<1%。当曲细精管受到药物或其它因素的影响或损害时，精液压中可见较多的病理型生精细胞。（见图11-3）。 图 图11-2 正常生精细胞 图11-3 异常生精细胞 五、免疫学检查 据 WHO估测，在育龄夫妇原因不明的不育症中，免疫性不育占约10-20%，近年来对免疫性不育机制的研究发展很快，了解到抗精子抗体是引起免疫性不育的重要原因之一。 （一）抗精子抗体 精子的抗原性很强，不仅可引起的异种免疫和同种异体免疫，其器官特异性抗原尚可引起自身抗精子抗体的产生，精管阻塞、睾丸损伤、炎症、附睾等副性腺感染均可使精子抗原进入血循环或淋巴系统，激活免疫系统引起免疫应答，产生身身抗精子抗体。精子出现包被抗体是免疫性不孕典型特征，精液中精子抗体几乎全部为IGA、IGG、IGA的临床意义可能更为重要，IGM在精液中极为罕见。ASAB与精子结合后可引起精子凝集、制动；抑制精子的项体活性，使之难以穿透包围卵细胞的放射冠和透明带，阻碍精了与卵细胞结合，即使完成受精过程亦可导致死胎或流产。检测抗精子抗体的试验有： 1．精子凝集试验（spermagglutination test,SAT）血清、生殖道分泌物中存在的ASAB与精子膜固有抗原结合，使精子出出头-头、头-尾、尾-尾的凝集现象。用试管玻璃片凝集法可或浅盘凝集法无凝集，或观察10个高倍视野6个以上视野无凝集者表示生育力正常。 2．精子制动试验（spermimmobilization test,SIT）ASAB与精子表面抗原相互作用激活补体系统，使精子项体破坏，膜通透性及完整受损，导致精子失去活力，正常时精子制动值<2。 3．免疫珠试验：免疫珠是用兔抗人免疫球蛋白共价结合的聚丙烯酰胺微球，可同时检测IGa 、IGG、IGM抗体。用洗涤后的精子悬液与免疫珠悬液混合后，免疫珠会粘附于表面有抗体的精子上，使用相关差显微镜观察，大于等于20%的活动精子同免疫珠粘附时为阳性，但至少有50%活动精子被免疫珠免疫被才认为有临床意义。 4．混合免疫球蛋白试验（MAR试验）用混合的未加处理的新鲜精液与包被人IGG的胶乳粒混合，再向混合液中加入特异的单克隆抗人IGG血清，在胶乳粒与活动精子之间形成混合凝集证明精子表面有IGG抗体存大。这可用为常规筛选方法。大于等于50%的活动精子同颗粒粘附表示可能为免疫性不育；10-50%活动精子与颗粒粘附，可疑为免疫性不育。 免疫珠试验与MAR试验两者结果并非经常一致免疫珠试验与血清精子凝集试验和制动试验呈正相并。如这些试验为阳性，还应辅经其它试验以加强诊断的正确性。 ASAB还可用其它现更敏感的方法检测如免疫酶法等，不育夫妇ASAB阳性者占25%-30%，其所针对的抗原绝大多数在精子膜上。 （二）精浆免疫抑制物质 人类精液含30多种抗原，但其进入女性生殖道后通常并不引起免疫应答，这是因为在精浆中含有免疫抑制物质（seminal plasma immunoinhibition material,SPIA）。SPIM免疫抑制效应可能是多种物质综合作用的结果，其中的妊娠相关蛋白A亦称为男性抑制物质能抑制机体对精子的免疫反应，保护受精卵免受排斥，以难维持正常生殖生理过程，据研究，MIM活性减低与不育症、习惯性流产、配偶对丈夫精液过敏等疾病密切相关的。一但MIM减低，对自身和配偶的ASAB形成抑制作用减弱，则抗体生成率增高；加一方面对ASAB的抗精了反应亦缺乏抑制力，故可引起上术疾病。MIM检测对上述疾病的诊断具有重要的意义。 精浆免疫抑制物质测定常用SPIM抗补体试验和MIM单向免疫扩散试验。 （三）精浆免疫球蛋白测定 正常男性精浆IGA、IGG、IGM含量分别为（90.3±57.7）mg/L(28.6±16.7)mg/L (2.3±1.9)mg/L.抗精子抗体阳性者IGM增高，生殖系炎症者分泌型IGA增高。 六、微生物学检查 男性生殖道任何部位感染均可从精液是检出微生物。迄今已人精液中检出的微生物达30多种。包括细菌、支原体、病毒和原虫等。常见的病在微生物有金黄色葡萄球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、类白喉杆菌、解脲支原体等。若炎症部位有较多的上皮细胞脱落，还可能在细胞内查沙眼衣原体包涵体的单纯疱疹病毒及巨细胞病毒包涵体等。据报道由生殖道感染所致不育症发病率比非感染不育症高四倍。 精液的细菌学检查应在常规消毒的条件下，以手淫法采集精液于无菌容器内，常规涂片进行革兰氏染色或抗酸染色检查等，亦可于37摄氏度液化30分钟后作细菌培养；需氧培养结果>1000CFU/ml方有临床意义。 近年来淋病奈瑟菌引起的生殖道感染有所增加，许多实验室开展了淋球菌快速检查项目，如直接荧光抗体染色等，亦有应用PCR技术检查者。直接荧光抗体染色灵敏度高，但特异性差，PCR技术需严防污染。 七、精子功能检查 精子与卵结合除精子浓度和数量因素外，还必须具备妆好的运动功能和对宫颈粘液、卵细胞放射冠、透明带及卵细胞膜的穿透力。精子穿透力是评价精子功能的主要指标之一，据报告，约18%精液常规检查正常的精子不能穿透宫颈粘液，所以检查精子功能对研究精子在体内运行，受精能力发及男性不育的原因有重要价值，其常用的试验有： 1．体内穿透试验：（in vivopenetration test）又称性交后试验。检查于排卵期性交后一定时间内宫颈中粘液活精子数量，存活率及活运动力，以评价精子对宫颈粘液的穿透能力，正常人可见>50个HPF有正常活动能力的精子。当宫颈粘液异常或有抗精子抗体时，精子体内穿透能力减弱或丧失。其结果还受雌激素分泌状况等多种因素影响。 2．体外穿透试验（invitro,penetration test） （1）简化玻片试验：将一滴宫颈粘液置载正玻片上，用盖玻片铺平，两片之间的厚度用哇化的玻璃珠控制，在载玻片两侧各滴一滴精液，使怀盖玻片边缘接触，借毛细作用将精液移向盖玻片，使宫颈粘液与精液之间现一清晰接触界面，37摄氏度卵育30分钟。精子在接触界面处形成一指状突起伸入粘液，精子穿过指状突起进入精液，然后呈扇形散开运动。本试验的观察指标为：①粗精了子穿透并有90%以上具有明确直线运动的活动精子时为正常结果；②精子穿透粘液，但离开粘液与沮液接触面<500μm为较差；③精子穿透粘液，但很快失活或仅作摆动力为异常；④精子未穿透与精液的接触界面，精子接触界面的精液侧凝集为异常结果。 本试验常带来有一定的主观性，因为在平面玻璃上使精液粘液触界面的大小和形状完全标准化是不可能和，因为而吸能定性评价精子粘液的相互作用。 （2）精子宫颈粘液接触（sperm-cervicalmucus contact,SCMC）试验：本试验的目的是检验精液和燥颈内是否存在损害精子运动功能的ASAB及其损害程度，精子与近排卵期的宫颈粘液等量混合，富强温下作用30min，镜下计数摆动的精子，求出摆动精子的出现率（%），以单独的精液滴镜检作为精子活力的对照，摆动精子的出现率越高，意味着精子不能穿过宫颈粘液。说吸ASAB对精子运动功能的损害越重，见表11-1。 表11-1 ASAB对精子运动功能损害

SCMC实验结果	摆动精子（%）	精子运动功能受损
阴性	0-25	无
弱阳性	26-50	轻微（可疑）
阳性	51-75	明显
强阳性	76-100	严重

玻片试验与SCMC试验阳性者可用其它供者的精液或燥颈粘液分别进行交叉试验，以利于判断ASAB的来源是清液或燥颈粘液。 （3）无透明带仓鼠卵-精子穿透试验（Zone free hamstar egg sperm penetration test,ZFHESPT）简称精子仓鼠卵穿透试验是一种极为严格的生物学试验，技术复杂，影响因素多。若能加强质量控制，再加上其它客观检查如精子活力等，可作为测定功能和基础。 其方法将精子于BWW培养液中经37摄氏度获能，再与用胰蛋白酶外理去除透明带的仓鼠混合继续孵育完成受精过种程。然后以相差显微镜检查，计数卵子受精率和受精指数。 受精率（%）=受精卵数/卵细胞总数×100% 由于卵细胞已去除透明带一个卵细胞可被多个精子穿透。FI为穿透卵细胞的精子总数与卵细胞总数之比，从整体上反映精子穿透力与项体反应。FI越高说明精子受精能力越强。 FI=穿透卵细胞的精子数/卵细胞总 [参考值] 受精率≥10% [临床意义] 精子仓鼠卵穿透试验可测定人精子的获能、项体反应和对卵细胞的穿透性能，综合反映精子的受精能力，生育力正常的男性本试验结果正常者占82%，不育症患者仅有2%正常，因此对不育症的诊断有较高的应用价值，穿透力较高的精子可选作人工授精用，成功率较高。

前列腺液（pristatic fluid）是精液的重要组成部分，约占精液的30%通过前列腺按摩术采集的前列腺液，常常混有精囊液，由按摩时触及精囊所致前列腺液成分较复杂，含有多种无机离子和有机化合物，其中前列腺特异抗原是前列腺癌的肿瘤标记之一。用于前列腺癌的诊断前列腺酸性磷酸酶更灵敏、特异。此外，前列腺液中还含有淀样小体，少量上皮细胞和白细胞等有形成分。 前列腺液检查主要用于慢性前列腺炎的诊断、病原微生物检查及疗效观察等，也可用于性病检查。 一、标本采集 前列腺液标本应由临床医师进行前列腺按摩术采集。液量少时可直接滴在玻片上，量多量收集在洁净干燥的试管内，若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液。采集微生物培养的标本无须无菌操作，将标本收集在灭菌的容器内。 疑为前列腺结核、脓肿或肿瘤的患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失败或检查结果阴性，而明确有临床指征者，可隔3-5天后重新复查。 二、一般性状检查 正常成年男性经前列腺按摩一次可采集数滴至1毫升前列腺液。前列腺炎时多减少，甚至采不出。正常的前列腺液稀薄，呈淡乳白色。前列腺或精囊炎进可变粘稠、黄煞费苦心混浊、呈脓性，有时含絮状物或粘液丝。若有出血可呈不同程度的红色，见于精囊炎、前列腺炎、前列腺结核、结石和恶性肿瘤等；也可因按摩时用力过重所致正常前列腺液呈弱酸性，PH6.3-6.5。超过50岁时稍增高。混入精囊液较多时，PH也增高。 三、化学检查 前列腺液的化学成分复杂，可因疾病而变化，故可将其作为鉴别诊断的参考指标。对上些显著的变化进行动态观察，尚可用以评价疗效和判断预后。常见前列腺疾病的前列腺液化学成分变化见表11-2。 表11-2 常见前列腺疾病前列腺液化学成分变化

	Zn(mmd/L)	Ld5/LD1	Tf(mg/L)	C3(mg/L)	C4(mg/L)	IgG(mg/L)	IgA(mg/L)	IgM(mg/L)
参考值	5.38±0.75	0.48±0.09	133±40	33±29	44±23	300±75	120±30	70±5
前列腺炎	1.84±0.38	4.21±0.80	154±41	64±16	47±10	720±215	260±120	140±65
前列腺肥大	6.07±0.79	1.36±0.17	192±44	49±14	77±24	__	__	__
前列腺癌	3.41±1.60	5.21±0.79	466±70	204±33	116±18	__	__	__

四、显微镜检查 （一）非染色标本 1．卵磷脂小体呈圆形或卵圆形、折光性强，大小不均，多大于血小板，在政党前列腺液涂片在均匀分布，布满视野。前列腺炎进卵磷脂小体减少，分布不均，有成簇分布现象，严重者卵磷脂小体可消失， 2．红细胞正常前列腺液中偶见红细胞，在前列腺炎、结核、结石和恶性肿瘤时可见红细胞增多；按摩时手法过重也可见红细胞增多。 3．白细胞正常前列腺液中WBC<10/HPF,分散存在。若WBC>10/HPF，成簇分布，是慢性前列腺炎的指征之一。 4．前列腺颗粒细胞：胞体较大含卵磷脂颗粒较多，可能是吞噬了卵磷脂颗粒的巨噬细胞，正常前列腺液中此种细胞不超芝1/HPF，前列腺炎时可增多数倍至10倍，老年人的前列腺液中也可见此种细胞增多。 5．淀粉样小体：圆形或卵圆形，具有同心圆线纹的层状结构，微黄煞费苦心或褐色，形似淀粉颗粒，故名淀粉样小体，其中心常含碳酸钙沉积物。如与胆固醇结合可形成结石。前列腺液中的淀粉样小体随年龄增长递增，无临床意义。 6．精子 因精囊受挤压而排出，无临床意义。 7．滴虫 见于滴虫性前列腺炎。 （二）染色标本 瑞特、H-E或巴氏染色的标本细胞结构清晰易辩，适合于检查炎症变性的细胞和癌细胞，有助于前列腺炎和恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断。 五、微生物学检查 用前列腺液制作涂片进行革兰氏染色或抗酸染色。革兰氏染色可橙出前列朱和精囊感染的病原菌。以葡萄球菌最常见的，其次是链球菌的革兰氏阴性杆菌（常为大肠埃希菌），也可见到革兰氏阴性球菌（淋病奈瑟菌的可能性最大）。前列腺液中的致病性分支杆菌只有结核分支杆菌一种。进行抗酸菌检查有助于慢性前列腺炎与结核的鉴别诊断。 涂片检查细菌阳性率低，且不易确定细菌种属，也有能用药敏感试验，故必要时尚需做培养检查。

阴道分泌物（vaginaldischarge）为女性生殖性系统分泌的液体，俗称“白带”。主要来自宫颈腺体、前庭大腺，此外还有子宫内膜、阴道粘膜的分泌物等。
阴道标本采集前24小时，禁止性交，盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部是药等，以名胜影响检查结果。取材所用消毒的刮板，吸管或棉拭子必须清洁干燥，不粘有任何化学药品或润滑剂。阴道窥器插入前必要时可用少许生理盐水湿润。根据不同的检查目的可自不同部位取材。一般采用盐水浸湿的棉拭子睚阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材，制备成生理盐水涂片以观察阴道分泌物。生理盐水悬滴可检查滴虫，涂制成薄片以95%乙醇固定，经过巴氏染色，吉姆萨染色升革兰氏染色，进行肿瘤细胞筛查或病原微生物检查。

在生量状态下，女性生殖系统由于阴道的组织解剖学和生物化学特点足以防御外界病原微生物的侵袭。从新生儿到青老大爷期，双侧大小阴唇合拢严紧，外女膜完整，阴道前后壁贴接，使管腔闭合，以青春期后，由于雌激素的影响，阴道上的上皮由单层变为复层。上皮细胞内底层外，均含有不同量的糖原，同时受卵巢功能的影响，有周期的变化及脱落，脱落后细胞破坏放出糖原，借阴道杆菌作用，将糖原转化为乳酸，使阴道PH保持在4-4.5之间，只有阴道杆菌能在此环境中生存。因此在正常健康妇女，阴道本身有自净作用，形成自然防御功能。 一、一般性状检查 检查正常阴道分泌物为白色稀糊状，一般无气味，量多少不特恙雌激素水平高低及生殖器官充血情况有关，于近排卵期白带量多，清澈透明、稀薄似鸡旦清，排卵期2-3天后白带混浊粘稠、量少、行经前量又增加。妊娠期白带量较多。 白带异常可表现为色、质、量的改变： 1．大量无包透明粘白带常见于应用雌激素药物后及卵巢颗粒细胞瘤时。 2．脓性白带：黄色或纲绿色有臭味，多为滴虫或化脓性细菌性感染引起的；泡沫疚状脓性白带，常见于滴虫性阴道炎；其它脓性白带见于慢性宫颈炎、老年性阴道炎、子宫内膜炎、宫腔积脓、阴道异物等。 3．豆腐渣样白带：呈豆腐查样或凝乳状小碎块，为念珠菌阴道炎所特有，常伴有外阴瘙痒。 4．血性白带：内混有血液，血量多少不定，有特殊臭味。对这类白带应警惕恶性肿瘤的可能，如宫颈癌、宫体癌等，有时某些宫颈息肉、子宫粘膜下肌瘤、老年性阴道炎、重度慢性宫颈炎和宫内节育器引起的副反应也可在白带中见到血液。 5．黄色水样白带：由于病变组织的变性、环死所致。常发生于子宫粘膜下肌瘤，宫颈癌、子宫体癌、输卵管癌等。 二、清洁度检查 将阴道分泌物加生理盐水作涂片，用高倍镜检查，主要依靠白细胞、上皮细胞、阴道杆菌与杂菌的多少划分清洁度，见表12-1。 表12-1 阴道分泌物清洁度分级

清洁度	所见成分	临床意义
Ⅰ度	大量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞0-5/HPF，杂菌无或极少	正常
Ⅱ度	中等量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞10-15/HPF，杂菌少量	亦属正常
Ⅲ度	少量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞15-50/HPF，杂菌较多	提示有炎症
Ⅳ度	无阴道杆菌有少量上皮细胞，白细胞>30/HPF，大量杂菌	多见于严重的阴道炎

卵巢功能不足、雌激素减低，阴道上皮增生较差时可见到阴道杆菌减少，易感染杂菌。单纯清洁度不好而未发现病原微生物，为非特异性了道炎。当清洁度为Ⅲ～Ⅳ度时常可同时发现病原微生物，提示存在感染引起的阴道炎。

（一）原虫
引起阴道感染的原虫主要有是阴道毛滴虫，可致滴虫性阴道炎。病人外阴灼热痛、瘙痒，阴道分泌物呈稀脓性或泡沫状，将此分泌物采用生理盐水悬滴法置于低倍显微镜下观察，可见波动状或螺旋状运动的虫体将周围白细胞或上皮细胞推动。在高倍镜下可见虫体为8-45μm，呈项宽尾尖倒置梨形，大小多为白细胞的2-3倍，虫体项端有前鞭毛4根，后端有后鞭毛一根，体侧有汉动膜，借以移动。此时阴道分泌物的清洁度为Ⅲ、Ⅳ度。
阴道貌岸然毛滴虫生长繁殖的适宜温度为25-42摄氏度，故在检验时应注意保温，方可观察到阴道毛滴虫的活动。阴道分泌物中查到阴道分泌物滴虫是诊断滴虫性阴道炎的依据，近年来采用阴道毛滴虫单抗制的胶乳免疫凝聚法剂盒可提高滴虫性阴道炎的诊断率。
在阴道分泌物中见到溶组织阿米巴滋养体时，提示为阿米巴性阴道炎。
（二）真菌
阴道真菌有时在阴道中存夺而无害，在阴道抵抗力减低时容易发病，真菌性阴道炎发找到真菌为诊断依据，阴道真菌多为白色假丝酵母菌，偶见阴道纤毛菌、放线菌等。采用悬滴法于低倍镜下可见到白色丝假酵母菌的卵圆形孢子和假菌丝。如取阴道分泌物涂片并时行革兰氏染色后油观察，可见到卵圆形革兰氏阳性孢子或与出芽细胞相连接的假菌丝，成链状及分支状。
（三）淋病奈瑟菌
淋病是目前世界上发病率较高的性传播疾病之一。国内统计约占门诊性病患者的40%。人类是淋病奈瑟菌唯一的宿主。在性关系紊乱情况下造成在人群中的广泛传染及流行。临床上多娄箐南现急性症状，少数为慢性过程。淋病奈瑟菌的检查首先采用涂片法，发宫颈管内分泌物涂片的阳性率最高，为100%；阴道上1/3部分为84%；阴道口处为35%。一般需将宫颈表面脓液试去，用棉拭子插入宫颈管1厘米深处停留10-30s，旋转一周取出，将分泌生淫在玻片上，革兰氏染色后油镜检查，找革兰氏阴道性双球菌，形似肾或咖啡豆状，凹面相对，除散在于白细胞之间外，还可见其被吞噬于中性粒细胞胞质之内，因淋病奈瑟菌对各种理化因子抵抗力弱，涂片法可被漏诊，必要时可进行淋病奈瑟菌培养，且有利于菌株分型和药过敏试验。近年来采用单克隆抗体技术生产的淋病抗血清，可与受检查者宫颈分泌物中的淋病奈瑟菌结合，采用免疫荧光技术，在30分钟内即可准确得出结果。比培养法快，比涂片支准确，较易掌握。此外运用PCR技术也可对淋病奈瑟菌过少，杂菌过多的标本进行诊断。
对于淋病非显性感染者，其淋病奈瑟菌的镜检出和培养检查常为阴性，但却是淋病的重要传染源。为此，近年来制备了多种检测淋病奈瑟菌的基因探针。大部分淋病奈瑟菌内含有多拷贝的4。2kb隐蔽性质粒，此外淋病奈瑟菌青毒素抗性主要是由编码β-骨酰胺酶的质粒决定的，用这两种质粒标记的探针与阴道分泌物进行斑点杂交可分别探测淋病奈瑟菌及其抗药性。其特异性敏感性均很高。目前还制备出淋病奈瑟菌DNA探针、菌毛探针和RNA探针，也建立了各种特异性高，敏感性强、简便快速的右面放射性标记的检测系统，成为淋病奈瑟菌及其抗药性检查的重要方法。
（四）阴道加德钠菌
阴道加德钠菌（Gardherellavaginalis;GV）和某些厌氧菌共同引起的细菌性阴道病亦属于性传播疾病之一。该菌还能以非性行为方式传播。除引起阴道病外，尚可引起早产、产褥热、新生儿败血症、绒毛膜羊膜炎、不后败血症和脓毒血症等。阴道加德钠菌产生高浓度的丙酮酸的氨基酸，可被阴道厌氧菌群脱羧基生成相应的胺，引起皮肤粘膜过敏。血管通透性增加，上皮细胞脱落，阴道分泌物呈奶油状大量排出，有恶臭。患者阴道分泌物革兰氏染色后可见阴道性或染色不定有时可染成革兰氏阳性的小杆菌。大小为（1.5-2.5）μm×0.5μm,具有多形性，呈杆状或球杆状，阴道分泌物PH常大小4.5，胺试验阳性。
除对阴道加德钠菌形态学鉴别外，还可进行阴道菌群检查，由于细菌性阴道貌岸然病时乳酸杆菌减少，加德钠氏菌的厌氧菌增加，可计算乳酸杆菌和加德钠菌的数量变化，作为本病诊断参考。一般取阴道分泌物涂片，革兰氏染色，用油镜观察3-5个视野，计算各种菌的数量。乳酸性杆菌为革兰氏阳性大杆菌，（1-5）μm×1μm，常成双，单根、链状或栅状排列，非细菌性阴道病乳酸杆菌>5个/油视野仅见少许加德钠菌。细菌性阴道病不仅可见到加德钠菌，还有其它革兰氏阴性或阳性杆菌，无乳酸杆菌或小于5个/油镜视野。
寻找阴道分泌物中的线索细胞，是诊断加德钠菌性阴道貌岸然病的重要指标。线索细胞为阴道鳞状上皮细胞粘附多数加德钠菌所致生理盐水涂片可见该细胞边缘呈现锯齿状。细胞已有溶解，核模糊不清，其上附着大量加德钠菌及厌氧菌，使其表面毛糙，有斑点和大量的细小颗粒，亦右用吖啶橙染色法或相差显微镜观察法检查线索细胞。此外还可用培养、荧光板、气-液色谱分析和PCR方法等助诊。
（五）衣原体
泌尿生殖道沙眼衣原体感染是目前很常见的性传播疾病之一，国外报道生殖道感染率为10。8%，由于感染后无特异症状，易造成该病流行，引起子性急性阴道炎和宫颈炎。及原体感染的白带脓性粘液，与细菌感染的脓性白带不同。取脓性分泌物涂片，吉姆萨染色，有进时可见到细胞内包涵体，但阳性率很低。过去采用传统的组织培养分离衣原体的方法，技术难度大，特异性敏感性均不理想，且费时费钱。目前应用较多的是荧光标记的单克隆抗体的直接荧光抗体法，可快速确定系何种血清型衣原体敏感。80年代发民展的DNA探针技术，可将阴道分泌物经PBS稀解，离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解，酚/氯仿抽提等处理后与沙眼衣原体探针，如外膜蛋白基因的高度保守序列，或TE-55DNA探针等进行斑点杂交，可检出沙眼衣原体的15个血清型，而与其它细菌，病毒、立克次体等无交叉反应，敏感性和特异性均为95%左右。DNA探针方法对泌尿生殖道衣原体疾病的诊断、流行病学调查和无症状衣原体携带者的诊断很有意义。
（六）病毒
在人类性传播疾病中有相当一部分是由病毒引起的。可从阴道分泌物中检测的病毒有：
1．单纯疱疹病毒（herpes simplex virus,HSV）有二个血清型，HSV-I和HSV-Ⅱ型。引起的生殖道感染的以Ⅱ型为主，约占85%。表南为生殖器官疱疹，溃疡并通过胎盘引起胎儿感染，发生死胎、流主和畸形。实验诊断多取病损处分泌物涂片进生细胞学检测、病毒培养或荧光抗体检测。在孕期感染的监测中，可采取宫颈部位分泌物做包涵体检查。单纯疱疹病毒以侵犯军团颈鳞状上皮多见。感染早期细胞轻度或中度增大，核呈嗜碱性不透明的匀质状毛玻璃样外观，偶伴有核空泡化。由于核的增殖与胞质肿大而形成多核或巨大细胞。感染晚期可发现细胞核内有嗜伊红包涵体，周围有透明晕，由于阴道分泌物检查阳性率低，病毒培养操作复杂费时，近年来对HSV的检查主要采用荧光抗体检查或分子生物方法诊断，特别是利用HSV基因组中特异性强的DNA片段棗HSV-I和HSV-Ⅱ，胸腺激酶的寡核苷酸探针和RNA探针进行分子杂交，可快速而灵敏地对HSV感染作出诊断。
2．人巨细胞病毒（human cytmegalovirus,HCMV）是先天感染的主要病原。一次感染后终年潜伏于体内，在机体免疫力低下时病毒激活，可表现为巨细胞包涵体病。孕期胎儿中枢神经系统受到侵犯可致小头畸形、智力低下、视听障碍等后遗症。故孕妇阴道分泌物巨细胞病毒检查对孕期监测尤其是重要的，常用宫颈拭子采取分泌物送检。HCMV实验室诊断方法除传播病毒离法外，光镜检测包涵体阳性就绪极低，电镜可直直接见到典型的疱疹病毒类形态结构，但无特异性，目前可采用CC-ABC法，即将标本接种于人胚肺成纤维细胞培养细胞，使病毒在敏感细胞中增殖，培养2天后收获，再用针对HCMV早期抗原的单克隆抗体，利用生物素亲和素放大作用染色鉴定。亦可用HCMV、DNA片段或RNA探针与样品进行斑点杂交，夹心杂交或 PCR后勤部的分子杂交来检测，临床最常用的方法是用ELISA法检测孕妇血清 HCMV-IGM来诊断活动性感染。
3．人乳头状病毒（human papillomavirus,HPV）HPV目前鉴别有50余型。引起妇性生殖道感染的有23型，其中最主要的有6，11，16，18，31，33，型。HPV感染细胞后细胞的作用的主要表现为：①增殖感染，即病毒在宿主细胞内复制，产生感染子代致使细胞死亡。②细胞转化，引起肿瘤发生，主要是引起生殖道鳞状上皮肉瘤样变，如16，18，31，33，35，29，型，尤其是宫颈癌患者以检查出16，18型为多见。HPV检测亦可采用传统的病毒培养、分泌物涂片、光镜检测。HE染色可见核周空晕。“气球样”病毒感染空泡细胞，但阳性率很低。下生殖道疣状赘生物者常可进行病理学镜可电镜检查，可峥到典型的病毒感染细胞或闰毒颗粒。目前常采用ABC法以兔抗HPV为一抗，生物素标记的羊抗兔IGG为二抗检测病毒抗原。或采用病毒相应的寡核苷酸探针，与阴道分泌物中提取的DNA进行斑点杂交或夹心杂交进行检测。如采用PCR技术则可检测极微量的HPV（即106个细胞中有一个感染细胞）

痰（sputum）是气管、支气管和肺泡分泌物的混合物。健康人痰量很少，当不呼吸道粘膜和肺泡近刺激时痰量增加。在病理状态下，人仅痰量增多，其性质也发生变化。痰液检查的目的为：①助诊某些呼吸系统疾病，如支气管哮喘、支气管扩张等；②确诊某些呼吸系统疾病，如肺结核、肺癌、肺吸虫病等；③观察疗效和预后判断等。
一、标本采集
留取痰标本的方法有自然咯痰，气管穿刺吸取、经支气管镜抽取等。采二者操作复杂且有一定的痛苦，故仍发自然咯痰为主要留取方法：但痰液要求新鲜，尤其以做细胞学检查者更为重要。留痰时患者先用清水漱口数次，然后用力咯出气管深处痰，留于玻璃、塑料小杯内或涂蜡的纸盒中。对于无痰或少痰患者可用经45摄氏度加温100g/L氯化钠水溶液雾化吸入，促使痰液易于咯出；对小儿可轻压脑骨柄上方，诱导咯痰。昏学患者可于清理口腔后用负压吸引法吸取痰液。痰标本必须立即送检，以免细胞与细菌自溶破坏。但PCr 可出现假阳性结果，对其临床应用价值目前仍处于研究和观察之中。测24小时痰量或观察分层情况时应将痰咯于无色广口瓶中，并加石炭酸少许以防腐。
采集标本时严防痰液污染容器外壁，用过的标本需灭菌后再行处理。
二、一般性状检查
1．量 排痰量以毫升/24小时计，健康人一般无痰，患者的排痰量依病种和病情而异患者急性呼吸系统感染者较慢性炎症时痰少；细菌性炎症较病毒感染痰多；慢性支气管炎、支气管扩张、空洞型肺结核和肺水肿患者痰量可显著增多，甚至超过100毫升/24小时。
2．颜色及性状：正常人偶有少量的白色或灰色粘液痰。病情况下可见：
（1）黄色脓性痰：其主要成分为脓细胞、提示呼吸道有化脓性感染，见于化脓性支气管炎、金黄色葡萄球菌肺炎、支气管扩张、肺脓疡等。肺脓疡时可呈浆液脓性痰，放置后可分为四层：是层为泡沫和粘液，中层为浆液，下层为脓细胞，底层为暗色组织碎片等。患者患铜绿假单胞菌感染者可有绿色脓痰。
（2）红色或棕红色痰：系因呼吸道有出血，痰中含血液成分所致可见于俩癌、俩结核、支气管扩张等疾病。
（3）铁锈色痰：乃因痰中所含有血红蛋白变性所致可见于大叶俩炎、肺梗死等。
（4）粉红色浆液泡沫痰：是由于肺淤血，局部毛细血管通透性增加所致见于左心功能不全肺水肿患者。
（5）烂桃样痰：见于肺吸虫病引起肺组织坏死分解时。
（6）棕褐色痰：见于阿米巴性肺脓疡、慢性充血性心脘病肺淤血时。
（7）大量吸入煤碳粉法或长期吸烟者可见灰黑色痰。
3．气味：正常人新咳出的少量的痰液无气味。血性痰可带血腥气味。肺脓肿、支气管扩张合并感染患者的痰液常有恶臭。晚期肺癌患者的痰液可有特殊臭味。膈下脓肿与肺沟通时患者的痰液可有粪臭味。
4．其他
（1）支气管管型（bronchial cast）：是纤维蛋折、粘液和白细胞等在支气管内凝集聚而成的树枝状物，呈灰白色或棕红色含血红蛋白。其直径与形成部位的支气管内径相关，一般较短，亦有长达15厘米的。在刚咳出的痰液中常卷曲成团，放入生理盐水中后即可展开，呈现典型的树枝状。见于纤维蛋白性支气管炎、肺炎链球菌性肺炎和累及支乞管的白喉患者。
（2）干酪样小块（cheesy masses）是肺组织坏死的崩解产生，形似干酪或豆腐渣，多见于胴结核患者痰中。取干酪样小块用作涂片检查结核分支杆菌时阳性率较高。
（3）硫碘样颗注（sulful-like geanule）是放线菌的菌丝团，呈淡黄色或灰白色，形似硫磺粗枝大叶粒，约粟粒大小，鼗其压片镜检可见密集的菌丝呈放状排列，状若菊花。革兰氏染色阳性，腓进一步培养鉴定。
（4）肺石（lung calculus）为淡黄色或白煞费苦心的碳酯钙或磷酸钙结石小块。表面不规则。呈丘状突起。可能为肺结核干酪样物质的钙化产生，亦可由侵入肺内的异物钙化而成。
（5）库施曼螺旋体（Curschmann spiral）为淡黄色或灰白色富有弹性的丝状物，常卷曲成团。展开后呈螺旋状。在低倍显微镜下所见为一扭成绳状的粘液丝，中央贯穿一无色发亮的致密纤维，周围绕发柔软的丝状物，该螺旋状物系小支气管分泌的粘液，因呼吸困难，肺内二氧化碳张力增高而凝固，受到喘息气流的间歇吹动旋转滚动而成。见于支气管哮喘和某些慢性支气管炎患者的痰中。
（6）寄生虫：有时于痰内可检出寄生虫，如卫氏并殖吸虫、蛔呦和钩蚴等，须用显微镜进一步确认。
三、显微镜检查
1．非染色标本
（1）红细胞：正常人的痰淫片中查不到红细胞。脓性普中可见少量红细胞。红细胞破坏或不典型时可用隐血试验证祥。血性痰中可见大量红细胞。
（2）白细胞：正常人的痰涂片中可查到少量白细胞中性粒细胞。呼吸系有细菌感染时痰中白细胞显著增加，常成堆存在，多为脓细胞，于支气管哮喘，过敏性支气管炎、肺吸虫病、热带嗜酸粒细胞增多症患者痰中嗜酸粒细胞增多。
（3）上皮细胞：痰中常见的上皮细胞有：①鳞状上皮细胞：是口腔、咽喉部脱落的上皮细胞，咳嗽痰时混入痰中。多为复层鳞状上皮脱落的表层细胞。在急性喉炎和咽炎时可有大量鳞状上皮细胞混入痰液；②柱状上皮细胞来自气管和支气管，包括纤毛柱状上皮和粘液柱门面上皮。正常人痰中极少见，在乞管和支气管粘膜发炎或癌变时脱落较多；③肺泡壁上皮细胞由单层上皮构成，含Ⅰ型肺泡细胞和Ⅱ型肺泡细胞。前者在光镜下不易与鳞状上皮细胞区别；后者呈圆形或立方形，二者需用染色涂片区别。政党人痰中一般查不到肺泡上皮细胞，当肺组织遭到严重破坏时可出现。
（4）肺泡巨噬细胞（pulmonary alveolar macrophage）存在于肺泡隔中，又称隔细胞，是一种较大的圆形或卵圆形细胞，较红细胞大3-6倍，含1-2个圆形细胞核，可通过肺泡壁进入肺泡腔，吞噬烟法颗粒和其它异物，形成尘细胞或含碳酸细胞等，随痰液排出体旬。最常见于炭末沉着症患者痰中。若肺泡巨噬细胞吞噬了红细胞，可将其破坏使血红蛋白降解，分解出血红素，再转变为含铁血黄素，则称这为含铁血黄素细胞，又称心功能不全细胞，可用普鲁士蓝反应鉴别。含铁血黄素细胞见于肺淤血。肺梗塞和肺出血患者的痰中，尤其多见于慢性肺出血如特发性肺含铁血黄素沉着症患者。
（5）癌细胞：若在非染色痰涂片中见到形态异常，难以认别的细胞，应进行染色鉴别，并注意寻找癌细胞。
（6）弹性纤维（elastic fiber）为粗细无孔不入、细长、弯曲、折光性强、轮廓清晰的丝条状物，无色或呈微黄色，由小支气管壁、肺泡壁或血利害等坏死组织脱落所形成，见于肺脓肿、肺癌等患者痰中。
（7）夏科-莱登结晶（Charcot-Leyden crystal）是两端锐利的无色菱形结晶，折光性强，大小不一。。常与嗜酸性粒细胞及库施曼螺旋体共存，在嗜酸性粒细胞堆中易找见。新咳出的痰中往往查不到，稍放置后可大量出现，可能是由嗜酸性粒细胞崩解而来。见于支气管哮喘和肺吸虫病患者痰中。
（8）脂肪滴和髓磷脂小体：二者形态相似，呈油滴状，但较大的髓磷化小全常含有同心性或不规则的螺旋条纹。偶见于健康人清晨痰中，于慢性支气管炎患者痰中易见。
（9）寄生虫和虫卵：①阿米巴：于阿米巴性肺脓肿或与肺贯通的阿米巴且脓肿患者痰中，可查到溶组织阿米巴滋养体；②卡氏肺孢子虫：见于肺孢子虫病患者痰中，但阳性率不高；③细粒棘球蚴和多房棘球蚴：当肺内寄生虫棘球蚴囊破裂时，患者痰中可检出原头蚴和囊壁碎片；④卫氏并殖吸虫卵：肺吸虫病患者痰，尤其是有脓血性痰时，多能查到该虫虫卵。也可用富集法查虫卵。
2．染色标本：痰涂片染色后能更清楚地显示细胞结构，有利识别和分类，临床应用价值较大。可用HE或巴氏染色检查癌细胞，瑞特染色检查白细胞，革兰氏染色或抗酸染色检查细菌等。
四、免疫学检查
痰中的SIGA为呼吸道上皮组织所分泌，具有防御病原微生物侵袭的作用。正常休痰液中SIGA为（2..03±0.21）mg.L，SIGA减少时，粘膜抵抗力下降，易患呼吸道感染；经有效治疗后，免疫功能改善，痰中SIGA可回升。支气管哮喘和过敏性肺炎患者，痰中SIGE可增多。
五、微生物学检查
痰中的微生物种类较多，在部分的是咳痰量混入的上呼吸道正常菌群。当支气管与肺部有感染时，可于痰中出现相应在的病原菌，如金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、结核分杆菌等。可取痰作涂片染色检查，最常用的是革兰氏当。还可进行培养，当有致病生长时需作药物敏感试验，对选择敏感的抗菌药物有帮助。
当怀疑结核感染时可采用：①抗酸染色；②金胺O染色；金胺O为荧光染料，可使结核分支杆菌着色，较经曲的抗酸染色阳性率高；③结核分支杆菌富集试验，是采用沉淀或漂浮法，使痰中结核分枝杆菌富集后粉笔片染色检查，阳性率较直接涂片法高。
如怀疑为支原体肺炎时，可于痰粉笔片进行直接或间接荧光抗体染色检查，有助于早期诊断。

痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。 支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。 一、标本采集和处理 通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出，要防止负压过大，过猛。分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF方能进行分析。分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。 二、细胞学检查 1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1，正常人的BALF含有核细胞为（5-10）×106/L。 2．淋巴细胞亚群分析：BALF中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR等以有助于发病机制的研究。正常人非吸烟者BALF中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。 3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。 表13-1 正常非吸烟者BALF细胞

作者	年	例数	注入量	回收量（%）	总细胞数（×106）	细胞（×106/ml）	Mac	Lym	Neut	Eos
Hunninghske	1983	8	100	52	14．0	26．9	93	7	0	0
北医大三院	1987	10	150	62	13．4	14．7	86	13	0．9	0．05
Ettensohn	1988	78	120	63	7．3	9．4	95	4	1	0

注：Mac巨噬细胞；Lym淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞 表13-2 正常非吸烟者BALF中淋巴细胞表面抗原表型

作者	年	例数	淋巴细胞（%）	总-?/FONT>T	TH	TS	h ：S	b 细胞
Yamada	1986	25	13．8	63．0	45．4	25．3	1．90	5．3
Wallaert	1987	12	7．7	66．4	48．4	27．5	1．8	?/FONT>

三、可溶性物质检查 BALF离心液的上清液中含有复杂的可溶性成份，例如各种蛋质、酶类、脂类等（表13-3）。这些成分的来源有：①被动漏出者（如白蛋白、血清类粘蛋白）；②主动转运者；③局部产生分泌成分。这些物质反映肺泡表面衬液成份，其测定对了解某些肺部疾病的病变特征，研究发病机制提供重要手段。 表13-3 BALF检测的可溶性物质

溶质	浓度近似值	溶质	浓度近似值
总蛋白	70μg/ml	纤维连接蛋白	30-150ng/ml
白蛋白	70μg/ml	白细胞弹性蛋白酶	+
免疫球蛋白		胶原酶	+
IGG	2.5-10μg/ml	血管紧张素转换酶	+
IGA	2.5-6μg/ml	极性脂质	78μg/ml
IGM	100ng/ml	非极性脂质	45μg/ml
IGE	0.06-0.3μg/ml	前列腺素E	200-2000pg/ml
α1-抗胰α蛋白酶	1-2μg/ml	血栓素B	25-85pg/ml
α2-巨球蛋白	0.04μg/ml
癌胚抗原	0.8ng/ml
转铁蛋白	4μg/ml

四、微生物学检查 1．涂片BALF不像痰液那样易受上呼吸道杂菌的污染，也不含气管和左右大支气利害的分泌物，含非病原性阿菌很少，故其涂片检菌的意义较大。取BALF沉淀物进行本兰氏染色与抗酸染色检查，对结核分支杆菌的检查有较大意义。 2．培养：严格无菌操作采BALF进行增菌培养或取其沉淀物直接分离培养，是检查支气管和肺部感染的重要方法，不仅适用于对细菌和真菌等检查，也适用于对支原体的培养和病毒分离，当培养的细菌为105CGU/ml时被认为有诊断意义。但标本采集方法复杂。 五、寄生虫学检查 1．卡氏肺孢子虫：人类一般受感染后多无明显症状。但若患者的免疫功能低下，特别是AIDS患者和大量使用免疫抑制剂的患者易受感染，并可引起严重的间质性肺炎。于患者痰中不易查到寄生虫，而BALF沉淀物检出的阳性率较高。 2．卫氏并殖吸虫卵：轻型肺吸虫病患者痰中可能查不到虫卵，而可从BALF沉淀物中查到。 除以上各项检查外，还可检查BALf 中有无其它异特。若在BALf 沉淀物中查到石棉小体，有助石棉肺的诊断。 六、临床应用 由于BAl 能获取肺泡表面衬液，因此对其内容物的检查有助于肺部疾病的诊断、治疗、预后判断及发病机制研究。其应用范围越来越广，此处钗做重点介绍： 1．肺部感染的病原学诊断：BAL检查在下呼吸道感染的检查中占有重要的地位。BAL可以收集较大范围肺实质的肺泡表面衬液标本，可进行原虫、病毒及细菌学等检查。对于普通细菌感染者其细菌培养大于等于105cfu/ml时为确定感染的阈值。但对于某些特殊感染，如在BALF中分离出结核分支杆菌、军团菌即可做出诊断。BALF对免疫功能低下合并肺感染的诊断也很有帮助，如对巨细胞病毒感染的敏感性达96%，对肺孢子虫的感染敏感性为85-90%。 2．BALf 检查：诊断呼吸道原发性或继发性恶性肿瘤有较好效果，也包括周围性肺癌、弥漫性肺恶性肿瘤（如支气管肺泡癌）、小细胞肺癌等。但BALF检查结果受癌类型和肿瘤大小的影响，以腺癌和肺泡癌阳性率最高。 3．对间质肺疾病的诊断、治疗评价及预后提供帮助 （1）外源性变应性肺泡炎：急性期BALF细胞总数明显增加，达对照组4倍。急性期早期肥大细胞增多，恢复后降至正常。淋巴细胞亦明显增多，其亚群以CD8+增多为主，CD4/CD8比值降低，CD57+和CD16+也增加。临床上认为BAl 是外源性变应性肺泡炎最敏感的检测手段。优于X线胸片及肺功能检查。 （2）结节病：BALF细胞总数增高，主要为T细胞增多，以CD4+为主。CD4/CD8比值明显增高，这些变化有重要的诊断意义。中性粒细胞和肥大细胞的增多预示病人闰变的有可能发展为纤维化。 （3）特发性肺间质纤维化：BALF中主要为中性粒细胞增多，嗜酸性粒细胞也可能增加，据此与以淋巴细胞增多为主的其它崩牙肿肺疾病鉴别。 BAL做为一种特殊的检查方法对某些其它肺疾患如支气管哮喘，成人呼吸窘迫综合征、弥漫性肺出血、肺泡蛋白沉着症（BALF外观呈乳状）等的临床意义也处于研究和观察之中。 BALF检查中细胞计数和分类包括T淋巴细胞亚群分类，经过多年的研究已基本标准化了，但对可溶性物质检查还存在某些问题，主要是灌洗液量与方法不同，对肺衬液稀释程度影响测定结果，尚须进一步的研究。 BAL应用越来越广泛，虽然其操作复杂，有上些生理性改变及轻度并发症，但只要选好适应的证，操作正确，还是一种安全有效的检查方法。进行BAL检查的禁忌证有：①严重的肺功能损害者；②新近发生急性心肌梗死患者；③新近发生大咳血者；④活动性肺结核未经治疗者等

唾液（saliva ）是腮腺、颌下腺、舌下腺和散在小唾液腺的分泌液。其分泌受神经反射的调节。唾液成分中水占99%以上；固体成分占约0.7%，其中有机物约占0.5%，无机物约占0.2% ，此外，还有少量白细胞、上皮细胞来自口腔粘膜和唾液腺、痕量作物以及口腔中的微生物。 影响唾液腺分泌的因素很多，诸如口腔内的理化刺激、机体对水的摄入量、情绪变化、环境因素、药物以及采集唾液的方法和时间等都全影响唾液的分泌速度和成分。因此唾液成分不够恒定。进行唾液分析必须严格控制实验条件，尤其是标本采集方法和时间，否则。实验结果无可比性。 唾液的主要生理功能是消化淀粉。唾液中的溶菌酶，乳过氧化物酶（lactoperpxidase）、乳铁蛋白和免疫蛋白等具有抵御微生物感染的作用。此外唾液还有润间湿口腔粘膜和齿面。缓冲酸碱反应，保护口腔粘膜和齿面免受酸碱浸浊的作用。 唾液中不仅含有内源物质唾液腺合成的物质和来自血液的物质，还可含有一些外源物质，如微生物，药物和毒物。故唾液除用于口腔内环境和唾液腺功能检查外，尚可用于某些全身性、代谢性疾病的实验诊断以及药物的监测、药物中毒的急诊检验等。因为唾液标本易于集且无损害，故该项检验日益受到重视。 一、标本采集 （一）混合性唾液 混合性唾液较易采集，但不能肥映单个腺体的状况。混合唾液主要来自腮腺和凳下腺，适用于评价口腔内环境。采集时间最好限定于午后2-4小时，让受检者自行收集或由医务人员帮助采集。采集时先用清水漱口，静息5-10分钟，弃去最初分泌物的唾液，将继续分泌的唾洗衣机收集于洁净的小杯内。至少2毫升。若液量不足，可嘱其做口舌运动，促进分泌。也可于舌下放一小块洗净、灭菌、干燥的脱脂纱布以吸收呼唾液，10min后取出，挤出唾液备用。 （二）单一腺体唾液 1．腮腺唾液：由口腔科医师采集，分导管法和吸盘法。 2．颌下腺唾液：较难采集，常混入舌下腺液。Mandel采用塑料吸盘法。鼗吸盘固定于舌下腺区收集唾液。 唾液标本收集后应立即送检。室温下放置后PH上升，细菌繁殖，析出沉淀，化学成分发生变化。一般性状检查和微生物学必须使用新鲜的标本。 二、一般性状检查 （一）量 正常人成人每日唾液分泌量为1-1.5l 。通常只测定15 分钟的分泌量，然后计算出单位时间的唾液分泌量，即唾液分泌速度或称唾液流量。 [参考值] 成人腮腺静止性唾液流量0.3-2.5ml/15min(0.02-0.17ml/min);刺激性唾液流量（柠檬酸刺激法）0.5-10ml/15min(0.3-0.67ml/min)。 [临床意义] 1．生理性变化：唾液流量受多种因素影响，个体间的差异也较大。老年人唾液流量低于青年人，儿童期流量较高，妊娠期明显高于孕前。 2．病理性变化①流量增高：见于流涎症、某些神经、精神性疾病如癔病，胃肠疾病如胃和十二指肠溃疡，口腔病如口颊炎及某些药物反应如使用毛果芸香碱时等；②流量减低：全唾液流量为0.2-0.9ml/15min时为唾液分泌减少；如为0.2ml/15min称口干症，见于唾液腺急、慢性炎症、涎石病涎石阻塞腺导管时，舍格伦综合征脱水，以及服用颠茄、阿托品、甲基多巴等药物时。 （二）颜色和透明度 正常唾液无色透明，可含泡沫。在唾液腺和口腔疾病时可呈不同颜色和混浊。红色混浊见于唾液腺和口腔出血。灰白色、浅黄色或绿色混浊铜绿假单脱菌感染见于上述器官的急、慢性炎症。 （三）粘度 唾液中含粘蛋白和其他有机物，正常时略带粘性。当唾液腺和口腔发生细菌感染时粘度增高；唾液朱导管发炎进可自然排出或经挤压后排出脓性、蛋清样或胶胨状粘稠液体，多见于慢性阻塞性腮腺炎。 （四）涎石 涎石（sialolith）是唾液导管内或腺体内形成的结石。以颌下腺结石发病率最高，占涎石病例83%，可于唾液中检出。 三、化学检查 （一）pH 正常唾液PH介于5.6-7.6。在口腔清洁度下降或唾液腺和口腔有细菌感染时，这些微生物可分解糖类产生有机酸，使唾液PH下降，齿表的蛋白保护膜受损，进而破坏牙釉质，易形成龆齿。 （二）隐血 正常唾液隐血试验阴性。当唾液腺或口腔器官因炎症、恶性肿瘤、结石或其它疾病而至出血时，镜检可见红细胞，若红细胞已破坏，可作隐血试验证实。 （三）非蛋白氮类物质 血浆中的尿素，肌酐和尿酸可通过唾液腺细胞进入唾液，在唾液中的浓度与血浆中浓度相关。测定以上物质在唾液中含量的临床意义与血液相同。 [参考值] 成人静止性唾液：尿素4.2±0.65mmol/L;肌酐39.8±7.1μmol/L;尿酸0.82±0.43mmol/L。 （四）激素 Shannon等研究结果表明，脂溶性非结合类固醇容易通过微循环和唾液细胞时入唾液，其浓度与血浆中的非结合类固醇浓度相关。如皮质醇、醛固酮、脱氢雄甾醇、睾酮、孕酮、雌二醇、雌三醇等无可通过唾液测　定，用于评价肾上腺皮质功能和生殖医学研究。 （五）酶类 1．淀粉酶（amylase）唾液中的淀粉酶主要由腮腺合成和分泌。正常人唾液中该酶活性很高，约为血清淀粉酶活性的105倍。唾液淀粉酶活性能反映腮腺的分泌功能。当腮腺实质因感染，恶性肿瘤等原因被破坏以及腺泡萎缩或发育不全而致功能缺损时，α-淀粉酶的合成和分泌减少，唾液淀粉活性减低。 2．溶菌酶（lysozyme）溶菌酶是由单链多肽组成的碱性蛋白质，分子量1.5万，等电点PH11 ，易与细菌结合，可水解革兰氏阳性菌细胞壁的粘肽，是体液中重要的杀菌物质，生理性减低见于妇女月经期，病进性减低见于恶性肿瘤，唾液溶核辐射酶尊低易致口腔感染。 （六）电解质 影响唾液电解质浓度的因素较多。一日内各种电解质的变化有一定的规律性，故每次测定采集标本的时间应一致以便作动态观察。 [参考值] 成人唾液电解质参考值见表14-1。 表14-1 唾液电解质参考值（mmol/L）

静止性唾液	刺激性唾液
腮腺 颌下腺 混合性	腮腺 颌下腺 混合性
钠 1-10 －6.5-21.7	20-60 21 43-46
钾 20-50 －19-23	10-30 17 18-19
Na/K －－>0.5-<1	－－－
钙 0.2-2.5 －1.43 ±3.4	－－2.2-2.6
镁 －－0.24±0.15	－－00.08-0.53
氯 －－10-20	23 20 20-40
磷酸盐碱 －－5.08±1.25	－－－

[临床意义] ①唾液钠、氯增高见于腮腺炎、唾液囊性纤维性变，Sjogren综合征、头颈部肿瘤放射治疗后及类风湿性关节炎等；减低见于充血性心力衰竭和肾上腺皮质功能亢进。②唾液钾增高，见于原发性醛固酮增多症和洋地黄中毒等。③唾液钙增高见于唾液腺囊性纤维性变。 （七）蛋白质 唾液中的蛋白质以粘蛋白为主，其它蛋白质含量较低。迄今已发现十余种唾液蛋白质和酶作为遗传标记物，对人类遗传学和法医学研究具有一定意义。 1．白蛋白：正常成人唾液中白蛋白浓度很低。当唾液腺患炎症、肿瘤等时，血液唾液屏障破坏，血浆白蛋白进入唾液，白蛋白增高。Sjogren综合征患者唾液白蛋白增高与腺体破坏程度呈正相关。 2．甲种胎儿蛋白：唾液中AFP参考值为14.3±4.9ng/L。肝癌时增高，且与血清AFP显著相关。 （八）治疗药物和毒物测定 1．治疗药物监测：血浆中游离型药物可进入唾液。研究结果证明，许多药物在唾液与血浆中的浓度之比值同血浆中游离型药物浓度与其总浓度的比值近似，说明唾液中的药物浓度与血浆中的游离型药物浓度大体一致（表14-2）。因此唾液药物浓度测定可在一定程度上反映血浆中的药物浓度治疗药物的监测和药物代谢动力学研究提供了方便条件。 表14-2 唾液-血浆药物浓度比值与血浆游离型药物比率的关系

治疗药物	药物浓度比值（唾液/血浆）	血浆游离型药物比率（游离型浓度/总浓度）
中文西平 英文名称
卡马西平	Carbamazepine	0.37	0.24-0.33
地高辛	Digoxin	0.78	0.77
苯妥英钠	Phenytoin	0.09-0.11	0.10-0.14
扑米酮	Primidone	0.97-1.08	0.78-0.97
茶碱	Theophyllime	0.52	0.41
苯巴比妥	Phenobarbital	0.30-0.38	0.40-0.68
水杨酸	Salicylic acid	0.30-0.40	0.20-0.55
甲苯磺丁脲	Tolbutamide	0.012	0.09
锂	lithium	2.20-2.30	1.90

2.毒物分析：唾液可用于分析毒，尤其是外源性的，例如：第一是汞：进入体内的汞能部分排入唾液，且与血浆浓度呈正相关，因此唾液汞含量测定可用于汞中毒的诊断及对汞作业者的职业病调查。二是乙醇：饮酒后乙醇很快被吸收进入血浆，继而从唾液排出唾液中乙醇浓度略高于血浆中浓度。测定唾液中的乙醇浓度对急性乙醇中毒的诊断与抢救具有实用的价值。 四、显微镜检查 （一）细胞 正常唾液中无红细胞，可见少量的鳞状的上皮细胞和白细胞。后者主要是单核吞噬细胞，多数胞质内含有吞噬的细菌。白细胞计数可达0.54×109/l 。口咽部和唾液感染，结石或患恶性肿瘤时，唾液中白细胞增多。口咽部或唾液腺出血时，唾液内可检出红细胞。以唾液沉淀物涂片进行细胞学检查，有助于炎症和肿瘤的诊断，唾液中检出癌细胞诊断口腔器官和唾液腺恶性肿瘤的有力证据。 （二）结晶体 根尖囊肿患者的唾液淀物中有时可检出胆固醇结晶和透明小体。后者为细小线粒状或弧形小体。 五、免疫学检查 （一）免疫球蛋白 唾液中的免疫球蛋白主要是SIGa 和IGG。可用RIA和单向扩散法测定。静止性唾液中IG含量常高于刺激性唾液。 [参考值] 成人静止性唾液SIGA：132.8 ±70.2mg/L;IGG:127.9 ±42.9mg/L。 [临床意义] 儿童唾液的SIGA和IGg 含量明显低于成人，随年龄的递增，16岁后接近成有水平。亦有文献记载于7-9岁SIGa 达到成有水平。 1．IG增高：①唾液腺的炎症、恶性肿瘤等可破坏血液-唾液屏障，使血液中的IG进入唾液，使IGA，IGG，IGM均可增高。②某些病毒感染如麻疹早期，可以唾液中检出特异性SIGA型抗体，有助于诊断。③Sjogren综合征属自身免疫性疾病，主要侵犯外分泌腺使唾液中SIGA增高。 2．IG减低：病理性唾液IG减低见于原发性或免疫缺乏病如先天性丙种球蛋白缺乏症、原发性选择性IGA缺乏症、应用免疫抑制剂和放射治疗时，齿患儿及大量吸烟者IGA也可能降低。 （二）病毒抗原和抗体 1．肝炎抗原和抗体唾液中HBSAG检查结果因采集唾液的部位而异以颊龈之间收集的唾液阳性率最高，有人用ELISA法检查29例血清HBSAG阳性患者唾液中HBSAG及51例甲型肝炎患者唾液中IGM型抗HAV，结果唾液中阳性率均为100%。说明唾液标本有助于进行甲型与乙型肝炎的实验检查。 2．HIV抗体唾液HIV抗体检查对AIDS具有诊断意义，适用于采血困难的患者的及细胞同型的血型物质，可用于以进行血型鉴定。 六、微生物学检查 （一）龋齿活动性试验 龋齿的形成与口腔环境的密切关系。唾液中的细菌可分解口腔内的糖类产生的机酸，破坏牙齿结构，促进龋齿形成。通常将对促进龋齿形成的各种因素的检查称龋齿活动性试验。常用的试验有乳酸杆菌计数培养和发酵试验。 1．乳酸杆菌计数培养：唾液中乳酸杆菌的多少直接关系到唾液中的机酸的产量和龋齿形成的可能性。唾液杆菌计数培养可反映龋齿的活动性。于早饭前以无菌操作技术采集2毫升唾液，稀释后定量接种于专用培养基中培养后进行菌落计数。算出每毫升唾液的含菌数。唾液中乳酸杆菌含量与龋齿活动性的关系见表14-3。 表14-3 唾液乳酸杆核辐射含量与龋齿活动性的关系

菌数/ml	龋齿活动性
0	阳性
1-1000	可疑
1000-5000	弱阳性
5001-10000	阳性
> 10000	强阳性

2．发酵试验：主要检查唾液中乳酸杆菌对葡萄糖发酵产酸的能力，较上术这试验简易。发酵试验阳性，说明被检者的龋齿活动性高于正常人。 （二）微生物与寄生虫学检查 引起的口腔和唾液腺感染的细菌和真菌均可于唾液中检出，可将唾液的离心沉淀物涂片进行革兰氏染色或抗酸染色等，欲得到确切的病原学诊断论据，尚须进行培养鉴定。急性坏死溃疡性龈炎，咽峡炎患者的唾液可检出梭状杆菌和文森螺旋体，鹅口疮患者唾液中可检出白色假丝酵母的孢子，唾液沉淀物中的白色絮状物涂片阳性检出率更高。病毒性腮腺炎和口腔炎患者的唾液中可进行病毒检查。 患阿米巴性齿龈或齿槽脓肿时，阿米巴滋养体右经瘘道进唾液而被查出，。寄生于齿垢或龋齿的毛滴虫滋养体也可于唾液压或脓汁中查出

95%以上的泪液由泪腺分泌，包括基础分泌和反射分泌。前者的分泌活动无神经支配，日夜不停；后者的分泌受交感神经、副交感神经和感觉神经等支配。当机体受到局部、全身或精神刺激时，通过神经反射产生泪液分泌效应，大量分泌泪液，形成泪流。 泪液由粘液、浆液和脂质组成。粘液比例<0.6%（睡眠时可达2%）；浆认占全泪的质占全泪的1.4%，散布于浆液表面，形成多分子膜，可反射光腺，赋予光泽，并可减少泪液蒸发。 泪液具有多方面的功能：①在眼表形成泪膜，防止尘埃、烟雾和微生物直接侵害眼球；②清除结膜囊内炎症产物，微生物等异物及脱落的细胞；③泪液吟吸多种抗微生物物质，如抗体、溶菌酶、乳铁蛋白等，可防御病原微生物对角膜和结膜的侵袭；④在眼睑和眼球之间起润滑作用，沽少磨擦，便于眼球运动，防止角膜和结膜损伤；⑤角膜前泪膜，尤其是泪膜表面的脂质层，形成完整光滑的光学表面，能无孔不入反射光线，利于外界景物在视网膜清晰成像；⑥泪液具有营养眼表组织和排除代谢产物的作用。 泪液检验主要用于评价泪腺功能、辅助眼病及某些全身性疾病和诊断和治疗药物的监测。 一、泪样采集 泪样采集方法不同时各成分的含量亦不同，应根据检查的目的和泪样用量选择采泪方法。采集的方法有： 1．刺激采泪法：右采集较多的泪液，发供多项试验应用。采集于下眼睑皮肤涂一薄层清凉油或针刺睛明穴，待出现反射泪液后用毛细管在外眦部吸取泪液。 2．毛细管采泪法：用内径0.20.3mm毛细管接触，泪液被引流进入毛细管。此法采集泪液几乎不含刺激性反射泪液。 3．吸附采泪法：将已称重的滤纸片放入受检者的下结膜囊内吸收泪液，待纸片被泪液饱和后取出称重。按泪液比密1.005计，求出纸片吸附的泪液量。 二、一般性状检查 外观：正常人泪液化气无色透明的液体，当结膜、泪腺感染、其炎性分泌物混入泪液进，可显不同程度的混浊，甚至呈粘液脓性。血性泪也可见于结膜为、泪囊和泪腺肿瘤等。 三、化学检查 （一）PH 泪液PH常用精密的PH试纸测定。亦可直接将微电极放入下穹窿，测定结果较准确。泪液PH与二氧化碳含量有关，故正常人泪液PH变动范围较宽，介于6.47.7之间。在闭眼时间较和后PH稍降低。干性角结膜炎、角膜损伤和春季结膜炎患者泪液PH常增高，而沙眼和细菌性结膜炎患者的泪液PH不增高。对眼病患者进行人工泪液补液治疗时，需严格控制泪液PH值。以期能较好地溶解粘液，改善眼部症状。故人工泪配制后须测定和校准PH。 （二）蛋白质 泪液中蛋白质含量较高，在刺激后的泪液中占0.30.7%。泪液中至少有20种蛋白质。故泪液蛋白有其特殊性。其中泪白蛋白、溶菌酶和乳铁蛋白为泪液的主要蛋白质，占泪总蛋白的3545%，全部来自泪腺。其含量高低与泪腺功能有关。 1．抗微生物蛋白质泪中含有多种抗微生物蛋白质，主要有溶菌酶、乳铁蛋白、补体和SIGA、IGG、IGM型抗体等。 （1）溶菌酶：人泪溶菌酶浓度很高，约为血清溶菌酶浓度的150200倍。溶菌酶减低见于：①StevensJohnson综合征、Sjogren综合征、眼瘢痕性类天疱疮患者，可减至正常人酶含量的一半或更低；②其他原因所致的干眼病；③感染、化学气体及烟雾等所致泪腺组织损伤；④使用β肾上腺素能受体阻滞剂，如心得宁、噻吗心安等治疗的患者。 （2）乳铁蛋白：与铁有很强的结合力，与铁的结合力比血清TF强300倍。且较稳定，在PH210间都能与铁结合，LF与Fe3+结合后，妨碍GN菌对铁的利用，从而干扰，抑制其代谢活动。LF还有直接杀菌作用。 泪液中的LF主要来自反射分泌和结膜副泪腺，含量丰富，约占泪蛋白总量的1/4。可用单向扩散或免疫比浊法测定，正常人泪液LF含量为1.042.23g/L,40岁后逐渐下降，70岁以上者为0.851.63g/L。反射泪比保留泪LF含量高，正常成人>3g/L.LF测定的临床意义同溶核辐射酶，但更为敏感。反射泪液LF<> 2．泪白蛋白：是由泪腺和结膜浆液腺产生的一种特殊蛋白质。在区带电泳中位于前白蛋白区，但其不与抗前白蛋白抗体发生反应。泪白蛋白具有遗传多型性，在聚丙烯酰胺电泳时分为5个带。这种遗传多型性可用于遗传学研究，此外，泪白蛋白测定也可用于评价泪腺的功能。 （三）酶类 泪液中有多种酶。临床意义较明确的有以下几种： 1．乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶：二者都来自角膜上皮，在泪中浓度较高。LD约为血清中的20倍。正常人泪液LD同工酶的构成比与血清相反，从LD1LD5依次递增，以LD4和LD5最多。泪液MD同工酶用乙酸纤维电泳可分离出MD5和MDM，正常人以MDS为主。患细菌性角膜溃疡及化学性角膜损伤时，泪液LD和MD活性减低。凡角膜上眼损伤者均可引起的LG同工酶H/M比值和MD同工酶中MDk不同程度的增高。 2．胶原酶：正常人泪液无胶原酶，于感染性角膜溃疡、干眼病、眼外伤、尤其是化学伤患者的泪液中可检出胶原酶的活性。 （四）电解质 泪液含多种电解质，各离子浓度多数与血液离子浓度相关。表144为反射泪液的电解质测定参考值。 表14 4 泪液电解质参考值

离子名称	离子浓度
K+	19.1±5.3mmol/L
Na+	125.4±17.1mmol/L
Ca+	0.76±0.32mmol/L
Mg2+	0.07±0.28mmol/L
Zn2+	31.98±12.09μmol/L
Cu2+	0.69±0.27μmol/L
Fe2+,Fe3+	9.31±5.02μmol/L
Cl	106±130mmol/L
HCO3	26±30mmol/L

泪腺囊性纤维性患者泪液钙离子浓度增高，而钠离子浓度减低。翼状胬肉、单纯疱疹病毒性角膜炎和慢性结膜炎患者泪液钙离子浓度明显减低。单纯疱疹病毒性角膜炎时泪液锌也明显减低，慢性结膜炎时还可见泪液铁明显减低。泪液钠、镁、重碳酸根和氯离子浓度与其在血清中的浓度显著相关，故其测定可间接反映血中的离子浓度。 （五）治疗药物监测 一些药物的泪液中的浓度与其在血浆中的游离浓度基本一致故泪液药物浓度监测不仅可反映部组织的药物浓度，也可间接反映血中游离药物浓度。 四、显微镜检查 （一）泪液和结膜分泌物涂片 正常人泪液直接涂片镜检，可见少量白细胞，偶见上皮细胞。化脓性结膜炎的结膜分泌物混入泪认，涂片可见大量的分叶核粒细胞。出血性结膜炎时尚可见大量红细胞。感染结膜吸吮线虫患者泪液涂片可见虫卵，偶见幼虫。眼蝇蛆病感染之初和反复感染者的泪液可检出蝇卵。涂片经瑞物染色后可进行细胞分类计数。化脓性结膜炎主要为大量中性粒细胞和上皮细胞，春季结膜炎和眼寄生虫病可见嗜酸性粒细胞增多。Siogren综合征和泪腺裂头蚴病的泪腺有淋巴细胞和浆细胞浸润，泪中亦可见淋巴细胞增多。 （二）角膜棉拭涂片 用棉拭子擦拭角膜后制作涂片，以甲醛复红奥新蓝染色后镜检。正常涂片中可见杯状上皮细胞和白细胞。于干性角膜结膜炎患者的涂片中可见角化上皮细胞，杯状细胞消失。若进行Giemsa染色检查，有时在结膜炎患者的上皮细胞内可见到嗜碱性包涵体染蓝色，呈圆形或椭圆形，直径为0.32.5μm,为局部用药，尤其是新霉素点眼损伤上皮细胞所致此包涵体不同于沙眼衣原体包涵体。几要时可用沙眼衣原体单克隆抗体加上鉴别。 （三）结膜印痕 以乙酸纤维薄膜轻压于结膜表面采集脱落细胞，经PAS和苏木精染色后镜检。正常人的结膜印痕片上的可见密集，互相粘连的小上皮细胞，其间散在许多椭圆、丰满、PAS强阳性的杯状细胞及PAS阳性碎屑。在眼类天疱疮患者的印痕片中只见多角形粘连不良的大上皮细胞，不见杯状细胞及胞外PAS阳性碎屑。 五、免疫学检查 泪液中具有多种抗微生物蛋白质，正常人泪液中的免疫球蛋白以SIGA和IGg 为主。各种Ig 含量的个体差异较大。泪液虽含多种补体，但临床应用较多者仅C3测定。 [临床意义] 因各家所报道参考值不一，故对患者测定结果的分析病人最好结合本实验室所用方法考虑。引起的IG及C3变化疾病的有：① IGA增高见于细菌性结膜炎、角膜炎或角膜溃疡、流行性出血性结膜炎。减低见于单纯疱疹性角膜炎、顽固性结膜炎、浅层角膜炎和蚕食性角膜炎患者。心得安中毒时泪中检不邮IGA。②IGG和IGM增高见于流行性出血结膜炎患者；沙眼无细菌合并感染时患者可减低。③IGE增高见于春季结膜炎以及支气管哮喘患者。④C3增高见于急性病毒性角膜炎、流行性出血性结膜炎等；减低见于虹膜炎。 六、微生物学检查 感染性外眼疾病的泪液与炎症渗出物混合在一起，难以截然分开。故泪液微生物学检查实际上是对上述混合物的检查。 泪液中常见微生物有:①细菌包括革兰氏阳性与阴性球菌与杆菌，常见者如白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌等；②真菌以曲霉菌检出率较高；③病毒：常见者有单纯疱疹病毒、腺病毒Ⅲ型和Ⅷ型等；④衣原体沙眼衣原体是引起沙眼的病原体。 微生物的检查可取泪液或结膜分泌物进生涂片染色以显微镜观察或做培养等。沙眼衣原体的检查也可用免疫学的方法，以抗沙眼衣原体抗检查，方法特异。

乳头溢液分生理性溢液和病理性溢液两类。前者见于妊娠期和授乳期妇女，后者是乳腺疾病的一种临床表现。发生乳头溢液最常见的疾病是导管内乳头头瘤占全部乳头溢液病例的SIZE="3">70%左右。乳腺癌所致乳头溢液占溢液总数的SIZE="3">10%左历。此外内分泌障碍、乳腺炎、乳腺导管扩张症等亦可引起乳头溢液。
一、标本采集
绝经前妇女较易得乳头分泌物。于月经周期的第四周，由于黄体激素的影响，乳腺分泌物增多，利于标本采集，采集标本前应进行乳房触诊，检查有无肿块及肿块位置，然后冼净乳头，擦干。若采集微生物培养标本尚须将乳头和乳晕部消毒后以无菌操作收集乳头溢液。若溢液较多，应以无菌纱布拭去最初的少量溢液，收集新分泌的溢液：①自然溢出液：根据检验目的直接收集于载玻片上，制备涂片或接种于培养基内即可。若溢液较丰富，亦可收集于小离心管内，经离心处理后取沉淀物涂片或接种培养。②有肿块乳腺分泌物自肿块的远乳头侧顺导管引流方向用手轻按摩和挤压，则集分泌物。③无肿块乳腺分泌物可沿乳晕周围轻轻做向心性按摩挤压，采集分泌物。④刮片或印片：乳头或乳房其它部位有糜烂、溃疡或瘘管口者，先拭去表面的腐烂坏死组织，再用小刮板刮取病理分泌物涂片，也可用消毒干燥的载正好片在病损部位轻压印片进行检查。
二、一般性状检查
（一）量
病理性乳头溢液量不定，通常经“+”号表示：①“-”：按摩挤压后不见溢液；②“±”按摩挤压后勉强溢出痕量；③“+”操作后溢出2-3滴；④“2+”轻压时呈细流射出；⑤“3+”自然溢出。
（二）外观
按外观性状可将乳头溢液分为6类。其中以血性和浆液血性最常见，约占溢液的50%以上；浆液性及乳头汁样次之；基客观存在类型较少见。
1．血性溢液呈深浅不同的红色或褐色，以导管乳头状瘤最多见，其次可能由乳腺癌所致尤其是导管内乳头状癌易致血性溢液。因此50岁以上的妇女特别是一侧乳头出现单孔血性溢液时应予高度重视，乳腺增生病和乳腺导管扩张症等疾病也可出现血性溢液。
2．浆液性溢液多呈微黄色，稀薄而透明。见于导管内乳头状瘤、乳腺增生症等约2.5%，
由乳腺癌所致。
3．水样溢液为无色透明，清澈如水。约50%由乳腺癌所致。
4．乳汁样溢液见于停止授乳后的妇女，有的长达数月甚至数年仍有少量溢液。此外可见乳腺增生症、溢乳闭经综合征、口服避孕药等。
5．粘液性溢液粘稠，常为双侧多导管自动溢液。多见于性功能低下者，如更年期妇女；亦可见于乳腺导管扩张症浆细胞性乳腺炎。
6．脓性溢液：多为黄色或乳黄色，浓稠，有时带血，是乳腺炎症的表现。见于急慢性乳腺炎、乳腺导管扩张症和乳腺结核。若为放线菌感染所致仔细检查可见硫磺样颗粒。
三、显微镜检查
制备薄膜片以瑞特、H-E或巴氏染色后镜检。后二种染色多用于脱落细胞检查。
（一）细胞
1．生理性溢液，可见于少量来自乳腺头的鳞状上皮细胞。在未孕妇女的涂片中偶见由几个导管上皮细胞组成的细胞群。妊娠时还可见巨噬细胞增多。通常不见粒细胞和淋巴细胞，只在分娩前后才能见到少量中性粒细胞和淋巴细胞，无红细胞，出现红细胞为病理性溢液。
2．病理性溢液：可见于下述细胞：①导管上皮细胞、大汁腺样细胞、泡沫细胞及鳞状上皮细胞增多；见于导管内乳头状瘤、导管扩张症、乳腺增生症、导管上皮增生症、慢性乳腺炎和内分泌障碍等；②上皮样细胞团和Langerhans多核巨细胞见于乳腺结核；③佩吉特细胞见于佩吉特病；④白细胞增多见于急慢性乳腺炎。急性化脓性炎症以中性粒细胞增多主；⑤红细胞多见于乳腺癌、导管内乳头状瘤、乳腺结核及乳腺炎等；⑥癌细胞以浸润性乳腺导管癌的溢液涂片癌细胞检出阳性率最高，而且形态典型；其次是导利害内癌。详见本书第二十一章第六节。
（二）钙化物
在H-E染色的涂片中呈深蓝色颗粒状，常成片面性分布，周围可有巨噬细胞包围。钙化物常见于癌性溢液的涂片中，也可见于某些妆性病如导管扩张症的溢液中。
四、显微镜学检查
引起乳腺感染的致病菌以金黄色葡萄球菌最为多见。还有其它各种细菌如肺炎球菌、铜绿假单胞菌等。结核分支杆菌可引起慢性乳腺炎。收集他头溢液或瘘管排出的浓汁做涂片染色，显微镜观察或做培养鉴定，可以诊断。