4．2幽门螺杆菌感染与家庭聚集现象有研究

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori , Hp)是慢性胃炎的主要病因，也可能是消化性溃疡特别是十二指肠溃疡的主要致病因素。有关Hp传染源和传播算什么尚不清楚，在家庭内密切的生活接触是否传播结论不完全相同。我们建立了间接ELISA法检测血清抗Hp抗体IgG的方法，对广东两地区三个自然村123个家庭545名成员进行血清流行病学调查，现将结果报告如下。 1 对象和方法 1.1 对象 1992—12～1993—02以广东省广州市从化县良口镇塘料村、广东省清远市横荷镇打古乡榕树村、清远市石湾镇红连村为调点，以家庭为单位，调查了123个家庭545名家庭成员（同住一起）。1岁以下儿童因可能携带母体抗体而剔除。 1.2　 方法 使用统一设计调查表，应用问卷方式，由专人填写。内容包括一般情况，生活饮食情况、身体健康状况，疾病家族史，经济情况、居住情况及精神心理状态等。填表后，每人抽取肘静脉血2ml，分离血清于-20°C保存待测。对545例受检者血清标本进行编码，至所有检测结果出来后破码。所有标本均用一人负责检测。血清抗HpIgG抗体测定：采用ELISA法检测血清抗HpIgG抗体。用Hp的纯培养物制备超声粉碎抗原，采用棋盘滴定法测定ELISA中各反应物浓度，用20μg/ml的抗原包被40孔聚苯乙烯反应板，待检测血清稀释为1:200，辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG稀释为1:1000，底物为邻苯二胺，用硫酸终止反应后，在490nm处读取吸光度值（A）。每个待检血清均作复孔，每块均设阳性、阴性对照，以阳性对照和阴性对照为质控标准，若比偏差＞5%,则弃去此板.结果用被检血清A值与阴性对照A之比表示,该比值≥2.0为阳性,＜2.0为阴性。该方法对诊断Hp感染的敏感性为94.1%。特异性为86.9%。 统计学处理 Hp感染率用百分率表示，各组数据比较采用X2检验。 2 结果 2.1自然人群抗HpIgG情况 抗体阳性268例，Hp感染率为49.17%，平均抗体水平0.53±0.15（X±SD）。243例男性受检者中，抗体阳性117例，Hp感染率为48.15%，平均抗体水平0.51±0.15,302例女性受检者中,抗体阳性151例，Hp感染率为50.00%，平均抗体水平0.54±0.16。受检男性与女性比较，Hp感染率及平均抗体水平均无显著性差异（P＞0.05）。三个自然村的一般情况：生活饮食习惯．身体健康状况．经济情况．居住情况及精神心理状态等因素之间，均无显著性差异（P＞0.05）。塘料村。榕树村和红莲村的家庭成员Hp（P＞0.05）感染率分别为46.25%、52.73%和50.13%，三者比较，无显著性差异（P＞0.05）。 2.2 Hp感染与年龄的关系 ＜5岁组，Hp感染率已达23.44%。5岁以上人群，Hp感染随着年龄的增长而增长，每年增加约1%，50岁以上人群Hp感染率高达83.65%（表1） 表1 广东农村545例Hp感染的年龄分布

年龄	检查例数	阳性例数	阳性率（%）	抗体水平（x±s）
1～	64	15	23.44	0.46±0.13
5～	104	31	29.81	0.47±0.14
10～	108	43	39.81	0.50±0.16
20～	57	27	47.37	0.52±0.16
30～	61	34	55.74	0.54±0.15
40～	47	31	65.96	0.61±0.13
50～	104	87	83.65	0.72±0.16
合计	545	268	49.17	0.53±0.15

2.3 父母Hp感染情况及其家庭成员的关系 父母抗Hp-IgG抗体水平为索引,对105户(父母均检查)家庭成员与父母Hp感染情况分析,结果45户父母抗体阳性的家庭成员(不包括父母在内)115例，Hp感染率70.43%(70/115)，平均抗体水平0.71±0.15，35户父母抗体均阴性的家庭成员107例，Hp感染率为24.30%(26/107)，平均抗体水平0.32±0.12，29户父母一方抗体阳性的家庭成员77例，Hp感染率为45.45%（35/77），平均抗体水平0.53±0.14。三组间比较，父母抗体均阳性的家庭成员，Hp感染和平均抗体水平显著高于父母抗体均阴性的家庭成员（P＜0.05），也高于父母一方阳性的家庭成员（P＜0.01），父母一方阳性的家庭成员显著高于父母均阴性的家庭成员（表2，P＜0.01）。 表2 广东农村父母Hp感染与家庭成员的关系

家庭关系	户数	例数	阳性例数	阳性率（%）	抗体水平（X±SD）
父母均阳性	41	115	70	70.43△*	0.71±0.15ab
父母均阴性	35	107	26	24.30△*	0.32±0.12ab
父母一方阳性	29	77	35	45.45*	0.53±0.14b

aP＜0.05,bP＜0.01 3 讨论 本研究是国内外首次采用间接ELISA法检测抗HpIgG抗体水平的方法，对农村家庭作整体Hp感染的血清流行病学调查，结果发现了Hp感染在农村家庭普遍存在，Hp感染率为49.17%。Hp感染男女之间无显著性差异（P＜0.05）。5岁以下儿童Hp感染率较高（23.44%），显著高于工业化国家的儿童，5岁以上人群Hp感染率随年龄的增长而增加，每年增加约1%，与文献报道一致。本文三个自然村的一般情况，生活习惯、经济情况、居住情况与精神心理状态等因素基本相同，Hp感染率也无显著性差异（P＞0.05），提示了Hp感染可能与上述因素有关。 许多研究证实，Hp感染在家庭中有聚集现象，Raums等调查了一个8名成员都感染了Hp的家庭，经DNA分析证实所分离出的Hp菌株属同一亚型。Miichchell等用ELISA法检测了4个Hp阳性患儿的14名家庭成员及166例对照的抗体，结果观察组阳性率为64%，对照组13%，认为胃内携带大量Hp者经密切接触可能通过呼吸道飞沫和粪一口传播。本文以父母Hp感染情况为索引，分析105个家庭的父母Hp感染情况与家庭成员的关系，结果父母抗体阳性的家庭成员，Hp感染率及平均抗体水平均显著高于父母抗体均阴性的家庭成员，提示了Hp感染在家庭中有聚集现象。说明Hp通过密切生活接触存在着人—人传播或同时暴露同一个传染源的可能性。

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori; Hp）是一个世界性问题我国属于感染率较高的国家。一些最新的资料提示，该菌感染可能与胃癌的发生有关。发展中国家胃癌的发生率很高，儿童Hp感染也很普遍，1992—12～1993—02我们对农村青年Hp感染情况进行家庭调查，旨在探讨其在家庭接触中Hp感染的频度、儿童年龄组Hp感染率以及Hp的传播途径。 1 对象和方法 1.1 对象 分取福建省长乐县、安徽省怀远县、广东省从化市的自然村各1个，共计调查了88个家庭20岁以下人群241人，1岁以下儿童因可能携带母体抗体而被剔除。 1.2 方法 血清学检测应用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）法，所有血清标本均在南方医院消化中心实验室由专人负责检测。每个标本的结果以待测血清OD值（P）与阴性对照OD值（N）的比值（P/N）表示，P/N<2.0为阴性，P/N≥2.0为阳性。本法诊断Hp感染的敏感性为93.9%，特异性为86.8%，阳性预测值90.7%，阴性预测值91.7%。全部数据在AST486微机上采用SAS统计软件完成。 2 结果 ①20岁以下人群Hp感染率及平均抗HpIgG抗体水平均以胃癌高发区的长乐为高（55.8%,2.11±0.60）、胃癌中发区的怀远为中（47.1%.1.98±0.41）、胃癌低发区的从化为低（29.4%,1.71±0.48），且高与低发区之间差异有非常显著性（P<0.01）。②3个地区Hp感染率均表现为随年龄增长而上升。各年龄组均以福建长乐Hp感染率高，且5岁以下组已达50.0%，说明胃癌高发区Hp感染的年龄亦早（见表1）。③父母Hp均为阳性者其子女Hp阳性率及平均抗体水平（56.9%,2.10±0.57）均显著高于父母均为阴性的子女（23.6%,1.78±0.52），P<0.01；但与父母一方为阳性的子女（47.7%,1.98±0.58）相比差异无显著性（（P<0.05）。④5岁以下儿童41例，母乳喂养30例，Hp阳性率为30.0%；人工喂养11例，阳性率为45.5%。自幼父母口嚼食物喂养史的22例中9例Hp阳性，占40.9%，无口嚼食物喂养史19例中5例阳性，占26.3%。其中有口嚼喂养史9例阳性中8例为母亲阳性者，仅1例母亲为阴性。 表1 从化、怀远、长乐三地各年龄组Hp感染情况

地区		1～	5～	10～	20～	30～	40～	50～	合计
从化	检查人数	13	43	32	27	30	23	29	197
	阳性率（%）	15.4	30.2	37.5	33.3	43.5	343.5	41.4	34.5
怀远	检查人数	14	17	23	66	34	28	31	213
	阳性率（%）	35.7	41.2	43.5	63.5	64.7	53.6	58.7	55.9
长乐	检查人数	14	42	32	44	40	19	38	229
	阳阳率（%）	50.0	54.8	53.1	72.7	67.54	47.4	55.3	59.4

3讨论 本组结果显示Hp感染率随年龄增长而升高，胃癌高发区Hp阳性率和平均抗体水平均高，且感染的年龄早，5岁以下组已达50.0%。胃癌中、低发区Hp阳性率也处于相应中、低水平，Hp感染率与胃癌死亡率的高低呈平行关系。同时发现父母均为阳性或父母一方为阳性的子女Hp感染率及平均抗体水平均明显高于父母均为阴性的子女，其中尤以父母均阳性的子女Hp感染率高且程度重，说明Hp可通过密切接触而人—人传播。我们调查了5岁以下儿童的喂养史，发现自幼有父母口嚼喟养的儿童，其母为Hp阳性者的感染率显著高于其母为阴性者，幼儿期感染与Hp阳性母亲的不良喂养习惯有密切关系。有人用聚合酶链反应及斑点杂交技术从牙垢、唾液及粪便中检出Hp，结合本组资料说明Hp可能是人—人、口—口、粪—口传播。初次感染Hp年龄较早的人群萎缩性胃炎及胃癌的发生率也高。

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）是慢性胃炎的主要病因，可能也是消化性溃疡，特别是十二指肠溃疡的主要致病因素。有关Hp的传染源和传播途径尚不清楚。在家庭内密切的生活接触是否传播，结论不完全相同。我们以家庭为单位，调查Hp的感染情况，探讨密切的生活接触传播Hp的可能性。 1 对象和方法 1.1 对象 因上消化道症状进行胃镜检查的患者，2个月内未服任何抗生素和铋剂，无手术史。内镜检查作出诊断，在胃窦部和体部取粘膜标本各2块，送病理检查，其标准参照悉尼胃炎分类法。在胃窦部取标本1块作尿素酶试验。根据组织切片Warthin-Starry银染色和尿素酶试验的结果确定有无Hp感染。随机选择12例Hp阳性教员和8例阴性者作为标引患者（index patient）。用ELISA检测血清抗HpIgG抗体。以这些标引患者为线索，对其所有密切接触的家庭成员（吃住在一起）进行调查，询问有无胃病症状，与标引线索，对其所有密切接触的家庭成员（吃住在一起）进行调查，询问有无胃病症状，与标引患者的关系。每人抽血2ml，分离血清于—20°C保存。共20个家庭103名成员。其中Hp阳性标引患者家庭12个，Hp阴性标引患者家庭8个。 1.2 方法 血清抗HpIgG抗体测定 用Hp的纯培养制备超声粉碎物抗原,采用棋盘滴定法测定ELISA中各反应物浓度。用20μg/ml的抗原包被40孔聚苯乙烯反应板。待检血清稀释为1:200，辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG稀释为1:10000。底物为邻苯二胺，用硫酸终止反应后，在490nm处读取吸光度值（A）。每个待检血清均作复孔，每块板均设阳性、阴性对照和空白对照，以阳性对照与阴性对照之比作为质控标准，若此偏差>5%，则弃去此板。结果用被检血清A值与阴性对照A值之比表示，该比值≥ 2.0为阳性，＜2.0为阴性。该方法对诊断Hp感染的敏感性为94.1%，特异性为86.9%。 对103例受检者的血清标本进行编码，直到所有检测结果出来后才破码。 2 结果 标引患者的一般情况列于表1。8例Hp阴性标引患者中（男3例），内镜诊断为十二指肠溃疡1例，轻度红斑渗出胃炎6例；12例Hp阳性标引患者中（男8例），内镜诊断为胃溃疡1例，十二指肠溃疡3例，复合溃疡2例，隆起糜烂性胃炎1例，红斑渗出性胃炎5例；两组组织学诊断均为慢性胃窦炎，其中8例有活动性。 表1 标引患者20例的一般情况

Hp	例数	平均年龄（岁）	抗Hp抗体水平（A）
阳性	12	43	0.91±0.49b
阴性	8	40	0.29±0.04b

bp<0.01 103例受检者中抗HpIgG抗体阳性50例（48.54%）。52例男性中抗体阳性27例（51.92%）,51例女性中抗体阳性23例(45.09%)。二者差异无显著性（P>0.05）。Hp感染在不同年龄组中的分布列于表2。Hp阳性标引患者家庭成员有64例，其中检出抗HpIgG抗体阳性者44例，阳性毫无疑问为68.75%，平均抗体水平为0.64±0.38(x±s)；Hp阴性标引患者家庭成员有39例，其中6例抗体阳性，阳性率为15.38%平均抗体水平为0.34±0.12，两组差异有非常显著性，（P<0.01），如果将标引患者剔除，Hp阳性者家庭成员的抗体阳性率和平均抗体水平仍显著高于Hp阴性者家庭成员（61.53%对19.35%，0.59±0.35对 0.35±0.13，P<0.01）。 表2 Hp感染的年龄分布

年龄组（岁）	检测例数	阳性例数	阳性率（%）
<10	18	5	27.78
10～	15	4	26.67
20～	25	12	48.00
30～	16	13	81.25
40～	10	4	40.00
50～	11	5	45.45
≥60	8	7	87.5
合计	103	50	48.54

Hp阳性标引患者家庭24例夫妻中有22例（91.7%）是抗体阳性，抗体水平为0.75±0.41。Hp阴性标引患者家庭16例夫妻中仅有2例（12.5%）为抗体阳性,抗体水平为0.35±0.13，两组差异有显著性（P＜0.01）。 父母抗体均为阳性的子女的抗体阳性率为63.6%(14/22),平均抗体水平为0.52±0.19;父母抗体均为阴性的子女的抗体阳性率为22.2%(4/18),平均抗体水平为0.35±0.13。两组差异有非常显著性（P＜0.01）。 3 讨论 本调查对象都来自农村，Hp感染率为49%，说明人群中Hp感染非常普遍。另外一个特点就是感染Hp的年龄较早，在10岁以下小儿感染率已超过20%，显著高于工业化国家儿童的Hp感染率。从全球来看，Hp的感染率在不同人群、不同人种、不同地区有很大差异。在发展中国家显著高于发达国家，可能与社会经济状况、卫生习惯和医疗水平有关。社会经济状况低的人群感染率高，在卫生条件差的弧儿院的儿童和收容所的低能弱智儿童感染率高，这些资料提示粪—口传播的可能性。还有人证明Hp抗体的阳性率与甲型肝炎抗体的增长平行，进一步支持通过粪—口途径传播。关于家庭成员间的密切接触是否造成Hp传播的问题，Jone等调查了40例Hp阳性慢性胃病患者的家庭成员，提出Hp感染在家庭内传播的可能性不大。Drumm等对93例有或无Hp感染儿童的家庭成员进行抗HpIgG抗体的调查，结果表明Hp感染在家庭内聚集性。我们通过对20个家庭的调查，证实Hp感染在家庭内有聚集现象，Hp阳性标引患者家庭成员无论是抗HpIgG抗体阳性率还是平均抗体水平显著高于Hp阴性标引患者家庭成员，提示通过密切的生活接触存在人—人传播的可能性，或家庭成员共同暴露于同一个传染源。本文结果还显示夫妻的抗体阳性率在Hp阳性标引患者家庭显著高于Hp阴性标引患者家庭，说明在获得感染过程中，生活环境比遗传因素更重要。