4．5 其它

由幽门螺杆菌（Helicobacterpylori, Hp）的尿素酶所分解产生的氨，长期作用于大鼠胃粘膜可破坏胃粘膜屏障，导致大鼠发生萎缩性胃炎。为阐明由Hp产生的氨对人胃十二指粘膜的影响及程度，在内镜下取组织行Hp培养、尿素酶试验、肉眼及病理诊断分类，并行胃液氨浓度（胃氨）测定，对胃十二指肠粘膜不同病理改变情况下的胃氨进行比较。
1 材料与方法
1991年2～9月在我院就诊的286例胃、十二指肠疾病患者及37例无症状志愿者。在胃镜活检前用胃管抽取胃液3～5ml，即刻用Nessler显色法测定胃液中的氨浓度；取胃窦部粘膜组织，作细菌培养和Hp鉴定，以尿素酶阳性为Hp感染。然后在病变部位取活检作病理学检查。
2 结果
正常人37例胃氨测定为11.86mg/L±5.19mg/L 范围为23.99mg/L～3.59mg/L。Hp阳性组（220例）的胃氨测定结果为21.50mg/L±4.10mg/L阴性组（103例）为15.30mg/L±6.30mg/L。阳性组明显高于阴性组，差异有非常显著性（P＜0.01）。各种胃、十二指肠疾病Hp阳性患者的胃氨均高于正常粘膜组Hp阳性者，除胆汁反流性胃炎和胃癌因病例较少外，其他均有统计学意义。各疾病组（Hp阳性+Hp阴性病例）的胃氨，除胆汁反流性胃炎外，同样明显高于正常胃粘膜组（P＜0.01）。慢性浅表性胃炎及十二指肠球炎的病变程度越重，其胃氨亦越高，差异有非常显著性（P＜0.01）；十二指肠球部溃疡活动期和治愈期的胃氨明显高于正常胃粘膜组（P＜0.01），而瘢痕期与正常胃粘膜组比，差异无显著性。
3 讨论
尿毒症、肝性脑病等血氨增高患者常并有消化道出血，严重者可导致死亡。近年来，人们发现Hp分泌和尿素酶可分解来自备注及食物中的尿素产生氨，而使胃氨增高。河内山报告Hp阳性者胃氨为2919mg/L，明显高于阴性者，但其值远较慢性肾衰患者低。为探讨这种增高的低浓度的氨对胃粘膜的影响，我们用0.01%～0.02% (10.00mg/L ～20.00mg/L)的氨水长期喂养大鼠，证实此浓度的氨水可破坏胃粘膜屏障，导致大鼠发生萎缩性胃炎和胃溃疡。
Hp阳性与阴性患者的胃氨测定表明，阳性组明显高于阴性组。胃氨导致胃粘膜损害的机制可能有以下几点：①氨对胃粘膜有直接毒性作用，长期作用于胃粘膜可导致粘膜损害。②氨可破坏胃粘膜屏障功能。用低浓度的氨水长期喂养，可导致大鼠的胃粘膜血流减少，电位差降低，胃粘膜前列腺素减少及胃粘膜PAS染色阳性层变薄。③氨可以在粘膜表面形成一个跨粘膜氨梯度，妨碍胃腺的H+进入胃腔，促进H+回渗。④氨的刺激也可能会在循环中产生抗体，通过变态反应造成组织损伤。
我们尚未见到有关胃氨正常值的报告。本研究使用血氨Nessler定量法，测定37例正常人的胃液氨浓度为11.86mg/L±5.19mg/L，作为初步的参考数据。
综上所述，由Hp的尿素酶所分解产生的氨与人胃十二指肠疾病密切相关，Hp感染越重，胃氨越高，胃十二指肠的病理改变就越严重。可见胃氨增高是Hp导致人胃十二指肠疾病发生的重要原因之一。本研究以尿素试验阳性为有Hp感染，可能存在一定的假阳性，造成实验误差。另外，Hp对胃肠粘膜损害的机理较复杂，氨并不是唯一的因素，应考虑到各种致病因素的综合作用。

我们应用常规微生物、病理技术及分子生物学方法在猫胃粘膜检出了幽门螺杆菌（Hp）。18只家养猫均自市场购得，运回实验室的当天宰杀，以排除实验室污染的可能性。杀死动物后立即剖腹，取新鲜胃粘膜组织作快速尿素酶试验（UAT）、涂片染色、常规石蜡包埋组织切片Warthin-Starry银染、细菌培养、寡核苷酸探针尼龙膜杂交及聚合酶链反应（PCR）检测。
18只猫中有15只UAT阳性，用Skirrow选择性培养基在37°C、5%的微氧环境下培养出3株Hp样细菌，培养基中加猫血或羊血比用人血生长好。有11只猫的胃粘膜及1株培养出的细菌的DNA被提取出来作杂交和扩增。寡核苷酸探针长27bp，系螺杆菌属细菌特异探针，经3’-OH端加尾标记半抗原地戈辛素后作膜杂交，11只猫胃粘膜有8只为阳性，猫胃培养菌也为阳性。PCR引物系幽站螺杆菌特异的16srRNA基因片段，扩增片段长500bp，该引物不扩增包括猫胃螺杆菌（H.felis）和空肠弯曲菌在内的近缘菌株DNA，在11只猫的胃组织中发现7只阳性者，一株培养菌也为阳性。病理切片银染则发现猫胃粘膜至少存在三种弯曲样菌（既往称之为幽门螺杆菌相关菌），一种为Hp样菌，形态与Hp相近，一种为Gh（人胃螺旋菌）样菌，菌体比Hp粗大且长，螺旋数多，与Gh及H.felis相近，另一种呈弯曲样菌，菌体较Hp长，形态与Hp相似，但螺旋不明显。双盲法观察，发现有大量Hp样菌的标本，其对应的DNA标本PCR均为阳性，而有Hp样或Gh样细菌定殖的标本，UAT及探针杂交均为阳性。
据此，我们认为，猫胃粘膜有Hp定殖，猫应该是Hp的动物宿主和传染源之一。由于猫是最常邮的宠物之一，因此明确其为Hp的动物宿主对该菌的防治有重要的理论和实用价值，且为Hp的动物传播理论提供了直接证据。